[发明专利]桡足类单个卵的DNA提取方法无效
| 申请号： | 200910112700.9 | 申请日： | 2009-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN101696408A | 公开（公告）日： | 2010-04-21 |
| 发明（设计）人： | 吴荔生;徐智焕;王桂忠;蒋洁兰;王超;陈丹 | 申请（专利权）人： | 厦门大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C07H21/04 |
| 代理公司： | 厦门南强之路专利事务所 35200 | 代理人： | 马应森 |
| 地址： | 361005 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 桡足类 单个 dna 提取 方法 | ||
【权利要求书】：
1.桡足类单个卵的DNA提取方法，其特征在于包括以下步骤：
1)将桡足类单个卵置于1×TE缓冲液中，加入蛋白酶K，使蛋白酶K的终浓度达2.5～ 5.5mg/mL，得混合提取液；
2)将得到的混合提取液通过一个热孵程序，得单个卵DNA的粗提液，所述热孵程序的 具体程序如下：37～60℃放置25～120min，然后在95℃温度下放置5min；
3)对单个卵DNA的粗提液由核酸共沉剂进行沉淀，得DNA沉淀。
2.如权利要求1所述的桡足类单个卵的DNA提取方法，其特征在于在步骤1)中，所 述1×TE缓冲液的pH为7.5～8.5。
3.如权利要求1所述的桡足类单个卵的DNA提取方法，其特征在于在步骤3)中，所 述沉淀的具体步骤如下：在单个卵DNA的粗提液中加入醋酸钠溶液和核酸共沉剂，继续加 入-20℃预冷的无水乙醇，10000～14000rpm离心10～30min之后弃上清，用乙醇清洗并干燥， 即得DNA沉淀。
4.如权利要求3所述的桡足类单个卵的DNA提取方法，其特征在于所述无水乙醇的加 入量按体积比为单个卵DNA的粗提液、醋酸钠溶液和核酸共沉剂三部分总体积的2.5倍。
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