[发明专利]一种莪术醇半抗原和人工抗原及其制备方法

权利要求书

1.一种莪术醇半抗原，其特征在于：它以莪术醇为原料，应用丁二酸酐与莪术醇反应生成莪术醇琥珀酸单酯制得，其分子结构式为：

2.一种莪术醇半抗原的制备方法，其特征在于：该方法步骤如下：

(1)取三氯甲烷置于反应瓶，加入少量无水MgSO₄，搅拌过夜，滤去MgSO₄；

(2)取上述滤液，加入莪术醇和丁二酸酐，搅拌溶解，加入适量的4-甲基氨基吡啶，于65℃回流，TLC检测反应进度，反应结束，冷却；

(3)将反应物倾入冰水中，用乙醚萃取，合并有机相，回收有机溶剂，得莪术醇半抗原粗品；

(4)用石油醚-乙酸乙酯进行硅胶柱层析，得到莪术醇琥珀酸单酯，即莪术醇丁二酸单酯，此即为莪术醇半抗原，置4℃冰箱保存，所述的石油醚与乙酸乙酯的体积比为8∶1。

3.一种莪术醇人工抗原，其特征在于：它以莪术醇为原料，应用丁二酸酐与莪术醇反应生成莪术醇琥珀酸单酯制得莪术醇人工半抗原，用MS质谱和¹³C-NMR谱测定半抗原的结构，再将莪术醇半抗原制备成吡啶水溶液，然后再与牛血清蛋白结合制成，其分子结构式为：

该方法步骤如下：

(1)称取莪术醇琥珀酸单酯，加入吡啶和H₂O，搅拌溶解，所加入的吡啶∶H₂O的体积比为1∶1；

(2)称取BSA，加入碳酸氢钠缓冲液，搅拌溶解，加入1-乙基-3(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺，将莪术醇丁二酸单脂的吡啶水溶液加入前反应液中，于室温反应15小时；

(3)将其反应物装入透析袋，用纯净水于4℃透析，每5小时换水一次，透析3天，经冷冻干燥，得Cur-HS-BSA，于-20℃下保存。