[发明专利]检测人血清铜蓝蛋白的免疫纳米金同步散射光谱试剂盒及其使用方法无效
申请号: | 200910114505.X | 申请日: | 2009-10-29 |
公开(公告)号: | CN101718779A | 公开(公告)日: | 2010-06-02 |
发明(设计)人: | 梁爱惠;韦丽丽;张静;蒋治良 | 申请(专利权)人: | 广西师范大学 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N33/536;G01N21/64;G01N21/47 |
代理公司: | 桂林市华杰专利商标事务所有限责任公司 45112 | 代理人: | 罗玉荣;周兆阳 |
地址: | 541004 广*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 血清 蛋白 免疫 纳米 同步 散射 光谱 试剂盒 及其 使用方法 | ||
1.检测人血清铜蓝蛋白的免疫纳米金同步散射光谱试剂盒,其特征是:它由下述三种试剂组成,其中试剂1含0.001-0.20mol/L枸橼酸、0.1-0.3mol/L磷酸氢二钠溶液和100-400g/LPEG 6000增敏剂;试剂2含50-200g/L PEG 20000稳定剂和30-60μg/mL纳米金标记羊抗人铜蓝蛋白(AuGCP)抗体;试剂3为校准品:铜蓝蛋白(CP)标准品溶液。
2.权利要求1所述试剂盒的使用方法,包括如下步骤:
(1)绘制标准曲线:
1)准备8支试管,各试管依次加入不同体积的试剂3,第一管不加标样作为空白对照管,每支试管加入600μL试剂1,混匀,每支试管加入640μL试剂2,混匀;
2)每支试管加入蒸馏水定容,使每根试管溶液最终体积为3.0mL,混匀后,在超声波清洗仪中反应20min,取适量置于石英比色皿中,于荧光分光光度计上,在激发波长等于发射波长的条件下同步扫描,得到体系的同步散射光谱,测定同步散射峰处的同步散射光强度I,不加CP作空白,测其同步散射光强度I0;
3)计算方法:多点标准曲线法,以第一管同步散射光强度作为试剂空白值I0,每一个样品的同步散射值为I,最终同步散射值按公式ΔI=I-I0计算;
4)以浓度C-最终同步散射值ΔI绘制标准曲线;
(2)按步骤(1)的方法制备样品测试体系,加入的是未知浓度的被测样品,并测其共振散射光谱值ΔI样;
(3)样品测得的最终同步散射值参照标准曲线,得到浓度值。
3.根据权利要求2所述的使用方法,其特征是:步骤(1)中所述的标准曲线线性范围为0.010-1.56μg/mL;相关系数≥0.9998;检出限为1.0ng/mL。
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