[发明专利]一种快速测定食品中低聚乳果糖含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种快速测定食品中低聚乳果糖含量的方法，特别涉及高含量寡糖半 成品或成品中低聚乳果糖的薄层色谱检测方法。

背景技术

低聚乳果糖(Lactosucrose，O-β-D-Galactopyranosyl-(1→4)-O-a-D-glucopyranosyl- (1→2)-β-D-fructofuranoside)，是一种由三个单糖组成的功能性低聚糖。一般以乳糖和 蔗糖为原料，经β-呋喃果糖苷酶作用下合成。由于低聚乳果糖难以在人和动物肠道吸 收、热量低，能显著促进肠道双歧杆菌、乳酸杆菌等益生菌的增殖，具有良好的保健 作用，是一种极具开发价值的功能性食品添加剂，有着广阔的应用前景。

目前，低聚乳果糖的检测方法主要有高效液相色谱法(配折光示差检测器、蒸发 光检测器或质谱)和薄层色谱法(Thin-layer chromatography，TLC)。虽然高效液相色 谱法检测准确，但是仪器昂贵，费用较高，不利于国内广大基层检测部门仪器落后、 操作人员素质普遍偏低的环境下推广，对于目前大多数国内食品企业生产检测不太现 实。

发明内容

本发明的目的是提供一种操作简单的检测食品中低聚乳果糖的方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

(1)配制一定梯度浓度的低聚乳果糖标准液；

(2)将低聚乳果糖标准液在薄层板上采用条带点样，条带的长度为1.5～3cm， 点样量为3～6μL，在层析缸中20～40℃恒温展开；

(3)展开剂展开后取出薄层板，吹干，喷上显色剂，置于80～100℃烘箱中显色 7～15min，自然冷却后取出显色板，在低聚乳果糖的显色区域，取1.5cm×4cm的条带 面积，收集于离心管中，加入2～4mL水摇匀超声10～20min后取出，3000～5000r/min 离心5～10min，取上清液。所述层析缸中展开剂是正丁醇∶冰乙酸∶水＝8∶3-4∶1-2， 显色剂为苯胺-二苯胺-磷酸，所述薄层板为硅胶薄层板(Si F250)。

(4)取1～2mL的上述上清液于具塞试管中，加1～2mL的5％苯酚溶液，摇匀， 迅速加3～5mL H₂SO₄，摇匀，沸水浴3～5min，取出，冷却至室温，在490nm处测定吸 光度。

(5)根据低聚乳果糖标准液吸光度和浓度绘制出标准曲线。

(6)将食品样品前处理，去除蛋白质、脂肪、淀粉或其他多糖类的物质，然后按 (2)-(4)的步骤进行操作，通过标准曲线计算出样品中的低聚乳果糖的含量。

本发明所述的检测方法，适用于各类食品中低聚乳果糖的薄层色谱检测。食品的 前处理，可根据GB/T 5009.7-2003所述的方法进行：

乳类、乳制品及含蛋白质的冷食类：称取约2.50g-5.00g固体试样(吸取25.00 mL～50.00mL液体试样)，置于250mL容量瓶中，加50mL水，慢慢加入4mL乙酸锌溶 液及5mL亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，沉淀，静置30min，用干燥滤纸过滤， 滤液备用。

汽水饮料：吸取100.0mL试样，置于蒸发皿中，用氢氧化钠(40g/L)溶液中和至 中性，再水浴蒸发至原体积的四分之一后，移入250mL容量瓶中，加水至刻度。

含大量淀粉的食品，称取10.00g～20.00g试样置于250mL容量瓶中，加水200mL， 在45℃水浴中加热1h，并时时振摇。冷后加水至刻度，混匀，静置，沉淀。吸取200mL 上清液于另一250mL容量瓶中，以下按乳类、乳制品及含蛋白质的冷食类中自“慢慢 加入5mL乙酸锌溶液......”起依法操作。

汽水等含有二氧化碳的饮料：吸取100.0mL试样置于蒸发皿中，在水浴上除去二 氧化碳后，移入250mL容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶中，再加水至 刻度，混匀后备用。

含脂肪比较多的食品：利用索氏提取法将其中的脂肪去除。

本发明所述的检测方法，也适用于酶促反应生产过程中低聚乳果糖含量的检测。 其过程是：将生产制造过程中含低聚乳果糖的半成品稀释2～50倍；然后按上述(2)～ (4)的步骤处理。