[发明专利]一种测定食品中棉籽糖和水苏糖含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种快速测定食品中棉籽糖和水苏糖含量的方法，特别涉及高寡糖含 量制品中棉籽糖和水苏糖的薄层色谱检测方法。

背景技术

棉籽糖(raffinose)，beta.-D-fructofuranosyl O-.alpha.-D-Galactopyranosyl-(1→ 6)-.alpha.-D-Glucopyranoside，由右旋半乳糖、右旋葡萄糖和左旋果糖各一分子组成， 是一种由三个单糖组成的新型功能性低聚糖。一般可以由棉子饼磨粉水解或甜菜糖蜜 制得的一种三糖。长期以来人们都认为棉籽糖是肠胃胀气因子，常常在加工过程中利 用各种方法将其除去。后来随着人们对棉籽糖的双歧杆菌促生作用的认识，发现棉籽 糖不仅仅是是一种优良的双歧杆菌增殖因子外，还具有低能量、能抑制肠内腐败产物、 改善排便功能、防止便秘及增强机体免疫力、抵抗肿瘤等多种生理功能。

水苏糖(stachyose)是一种非还原性四糖，存在于豆科植物中，是大豆中的主要 碳水化合物。它对人体有双重作用。(1)有害作用。由于人体的消化系统中不分泌α- 半乳糖苷酶，不能消化水苏糖。但该糖进人大肠后能被细菌分解，产生二氧化碳，氢 和甲烷，易引起腹胀，成为豆类食品中的抗营养因素。(2)保健作用。由于此糖难以消 化，对胃酸稳定，经口摄入后不被消化而到达人体结肠，被此处的双歧杆菌等有益菌 选择代谢利用。此外，水苏糖还具有耐热、耐酸的特性。可将其添加到清凉饮料和酸 性食品中作为配料，可供体内双歧杆菌等有益菌减少的老年人、体质虚弱者、糖尿病 者和非母乳喂养的婴儿食用。

目前，棉籽糖和水苏糖的检测方法主要有高效液相色谱法(配示差折光检测器、 蒸发光散射检测器或质谱)和薄层色谱法(Thin-layer chromatography，TLC)，HPLC 法虽然准确，但是仪器昂贵，费用较高，不利于国内广大基层检测部门仪器落后，操 作人员素质普遍偏低的环境下推广，对于目前大多数国内食品企业生产检测不太现实， 因此，建立一种快速准确测定棉籽糖和水苏糖的方法很有必要。

发明内容

本发明的目的是提供一种操作简单的检测食品中或大豆低聚糖中棉籽糖和水苏糖 含量的方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

1、棉籽糖或水苏糖标准曲线的绘制。

(1)配制一定梯度浓度的棉籽糖或水苏糖标准液；

(2)将棉籽糖或水苏糖标准液在薄层板上采用条带点样，条带的长度为2～3cm， 点样量为5～6μL，在层析缸中25～35℃恒温展开；

(3)展开后取出，吹干，喷上显色剂，置于85～100℃烘箱中显色7～15min，自 然冷却后取出显色板，在棉籽糖或水苏糖的显色区域，取2cm×4cm的条带面积，收 集于离心管中，加入3～4mL水摇匀超声10～20min后取出，3500～5000r/min离心5～ 10min，取上清液。所述层析缸中展开剂是乙腈∶冰乙酸∶水(5～7∶2～4∶1～3)， 显色剂为苯胺-二苯胺-磷酸，所述薄层板为硅胶薄层板(Si F250)；

(4)取1～2mL的上述上清液于具塞试管中，加1～2mL的5％苯酚溶液，摇匀， 迅速加5mL H₂SO₄，摇匀，沸水浴3～5min，取出，冷却至室温，在490nm处测定吸光 度；

(5)根据棉籽糖或水苏糖标准液吸光度和浓度绘制出标准曲线。

2、食品样品中棉籽糖或/和水苏糖含量的测定。

将食品样品前处理，去除蛋白质、脂肪、淀粉或其他多糖类的物质，然后按棉籽 糖或水苏糖标准曲线的绘制中(2)-(4)的步骤进行操作，通过上述标准曲线计算出 样品中的棉籽糖或/和水苏糖的含量。

本发明所述的检测方法，适用于食品中棉籽糖和水苏糖的薄层色谱检测。前处理 完成之后，按上述(2)-(4)的步骤处理。食品前处理参照GB/T 5009.7-2003所述 的方法来处理：

乳类、乳制品及含蛋白质的冷食类：称取约50.0g～100.0g固体试样(吸取25.00 mL～50.00mL液体试样)，置于250mL容量瓶中，加50mL水，慢慢加入4mL乙酸锌 溶液及5mL亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，沉淀，静置30min，用干燥滤纸过 滤，滤液备用。