[发明专利]一种测定环吡酮胺的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，涉及一种测定环吡酮胺的方法，更具体的 说是一种通过环糊精包合环吡酮胺来测定环吡酮胺乳膏中环吡酮胺的高效 液相色谱方法。

背景技术

环吡酮胺又名环吡司胺、环匹罗司胺。分子式为C₁₄H₂₄N₂O₃，其结构式 如下：

分子量为268.36，具有低毒性和强力的血清渗透的特点，它对皮肤真菌、白 色念珠菌等有强力的灭菌作用，在治疗真菌引起的皮肤角质化疾病上有较 好的效果。其浓度为4～8μg/ml时可抑制皮肤真菌和酵母菌，较高浓度 (16～78μg/ml)时对大肠杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球 菌等也有抑制作用(引自文献1：United States Pharmacopoeia 28-NF23， United States Pharmacopoeia Convention，Inc.，Rockville，MD，2005，p.470.)。 由此可知，环吡酮胺的浓度对于抑制表皮或黏膜的浅表真菌和白色念珠菌 感染是非常重要的。目前定量检测环比酮胺浓度的方法有如下几种：

分光光度法测定环吡酮胺虽然是最常用的检测技术(引自文献2：艾玉 锁，环吡酮胺乳膏含量的分光光度法测定；西北药学杂志.19905(1)2～3)， 但由于其在精确定量和在同类化合物中特异性测定环吡酮胺的不足，该方 法不能应用于稳定性研究及药物生产过程中的质量控制。另有文献(引自 文献3：Escarrone，A.L.V.et al LC-UV method with pre-column derivatization for the determination of ciclopirox olamine in raw material and topical solution Chromatographia 200867(11-12)967-971)介绍，使用高 效液相色谱柱前衍生的办法定量检测环吡酮胺，必须经过复杂的柱前衍生 步骤，但衍生化过程使得其它组分不稳定，并不适用于药物生产过程中的 快速检测。

美国药典(USP)有一种用高效液相色谱法检测环吡酮胺的方法(引自文 献1：United States Pharmacopoeia 28-NF23，United States Pharmacopoeia Convention，Inc.，Rockville，MD，2005，p.470.)，在其条件下，由于伯羟基 基团与金属盐离子的强烈螯合效应，环吡酮胺的物质峰有严重的拖尾现象。 为了降低螯合效应，在实验前，先用水∶乙腈∶冰醋酸∶乙酰丙酮(500∶ 500∶1∶1)的混合洗脱液，冲洗色谱柱至少15h，再用流动相冲洗至少5h。 但是，即使经过了如此长时间的冲洗，这个方法仍然不能成功的检测环吡 酮胺。

发明内容

在上述前人工作的基础上，本发明的目的在于提供一种测定环吡酮胺 的方法。该方法利用β-环糊精的包合作用，将β-环糊精添加到高效液相 色谱的流动相中，使其与环吡酮胺形成特殊的包合物，降低其在色谱柱上 的吸附作用，利用紫外检测器检测环吡酮胺。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现：

一种测定环吡酮胺的方法，其步骤是：

a.环吡酮胺标准品溶液的制备

用乙腈作为溶剂配制环吡酮胺标准品贮备液：移取一定体积的贮备液， 用乙腈稀释至若干份不同浓度的溶液，然后将上述标准溶液置于紫外灯下 照射，制得标准溶液；

b.样品的预处理

准确称取适量环吡酮胺乳膏，置于10mL容量瓶中，加入无水乙醇7mL， 超声20min后用无水乙醇定容，继续超声5min，用0.45μm有机微孔滤膜 过滤，移取1.0mL滤液于10mL容量瓶中，用乙腈定容摇匀，然后将上述 标准溶液置于紫外灯下照射，进样前用0.45μm有机膜过滤；

c.液相色谱的测定