[发明专利]依替巴肽的固相合成方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物的制备方法，具体地说，本发明是一种依替巴肽的固相合成方法。

背景技术

依替巴肽(Eptifibatide)是一种含一个巯基丙酸和六个氨基酸残基的环肽，它的分之式：C₃₅H₄₉N₁₁O₉S₂，它的序列是：

依替巴肽是血管和血液系统药物类中的抗凝药，为无色非晶态无定型的白色粉末，在水中易溶。它的主要作用是选择性的阻断糖蛋白IIb/IIIa与黏附蛋白的结合，对黏附类相关的受体有一定的弱抑制作用，在低浓度可对二磷酸腺(ADP)和肾上腺素引起的血小板聚集起到阻止的作用。

目前这个产品国外的生产厂家是瑞士的Bachem公司，Bachem公司的合成路线是液相合成法和BOC策略法，液相合成周期比较长，BOC法合成对环境污染大。

中国专利申请02145292.X(申请日2002年11月14日，公开日2004年6月2日)公开了一种制备依非巴肽的新工艺，该新工艺采用片段合成法，是先用Fmoc-Rink Amide AM Resin为起始原料载体，然后依次接上Fmoc-Cys(trt)-OH₂，Fmoc-Pro-OH₂，Fmoc-Trp(boc)-OH₂，Fmoc-Asp(otbu)-OH₂和Fmoc-Gly-OH₂，然后利用H-Lys-OH为起始原料合成高精氨酸。该技术的主要特点是把巯基丙酸当作赖氨酸的保护基团引入，再利用两个片段进行合成。这个方法的优点是能够比较好地解决高精氨酸的液相合成问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种依替巴肽的固相合成方法。

为了说明的方便，先列出官能团的简称与全称的对照：

Fmoc：芴甲氧羰基        Otbu：叔丁氧基

HOBt：1-羟基苯骈三唑    DIC：N，N-二异丙基碳二亚胺

Cys：半胱氨酸        Trp：色氨酸        Har：高精氨酸

Pro：脯氨酸          Asp：天冬氨酸      Gly：甘氨酸

Boc：叔丁氧羰基

Pbf：2，2，4，6，7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰

DMF：N，N-二甲基甲酰胺

Piperdine：六氢吡啶

Fmoc-Rink-AM Resin：芴甲氧羰基氨甲基树脂

TFA：三氟乙酸        HAC：醋酸

Kaiser test：茚三酮

Trt：2-氯三苯基      EDT：乙二硫醇

DIEA：N，N-二异丙基乙胺

MeOH：甲醇           ACN：乙腈          Mpr：巯基丙酸

为了实现上述的发明目的，本发明采用以下技术方案：

在载体树脂上进行氨基酸缩合，所得树脂烘干后以三氟乙酸进行切割，得到依替巴肽粗品；然后将粗品用水溶解，以双氧水进行氧化来增加粗品在水中的溶解度，氧化时间30～60分钟；以醋酸中和并过滤后，对滤液进行HPLC纯化，收集特征峰；然后将收集物旋蒸并浓缩、冻干，即得醋酸依替巴肽精品。

双氧水的优选用量是依替巴肽粗品体积的0.1～0.5％。所得树脂烘干后以三氟乙酸进行切割，切割是以87.5wt％的三氟乙酸在30℃条件下处理2个小时。

所述的氨基酸缩合是将Fmoc-Cys(trt)-OH₂，Fmoc-Pro-OH₂，Fmoc-Trp-OH₂，Fmoc-Asp(otbu)-OH₂，Fmoc-Gly-OH₂，Fmoc-Har-OH₂，Mpr(trt)依次连接在Fmoc-linker-AM Resin上。