[发明专利]大黄素素分子印迹聚合物的制备及应用

说明书

所属技术领域：

本发明专利涉及的是一种医药化学工程技术领域的方法，具体涉及大黄 素分子印迹聚合物的制备及利用该聚合物为固相萃取剂分离、纯化天然产 物中的大黄素的方法。

背景技术：

大黄素属于蒽醌类成分，现代药理学研究表明，大黄素有广谱抗菌、保 肝利胆、抗肿瘤、降血脂、止血活血、镇痛消炎发、利尿、改善肾功能、 提高免疫力等多方面作用。大黄素对体外培养的癌细胞有不同强度的生长 抑制作用，对悬浮型癌细胞生长的抑制作用较强，并且具有选择性抑制神 经外胚层肿瘤活性的作用，为一新型抗癌剂。

中药在疾病治疗中的作用越来越得到世界的认可，其地位得到显著的 提升，但传统中药的丸、散、膏、丹等多数剂型是由中药浸取液不经提取 或仅经过粗提取而制成的。随着时代发展和技术进步，其弊端逐渐突出： 有效成分浓度很低，导致剂量很大，起效慢，吸收和利用度不好，特别是 对重病患者或不便口服的患者疗效不佳；有效成分和杂质混杂没有深度区 分，疗效不确切；传统剂型富含糖类等可供微生物滋生的营养成分，在生 产或使用过程中容易被污染，达不到医药卫生标准，很难长期保存；浓重 的味道难以被西方国家的患者所接受。

传统的中药有效成分提取存在着步骤复杂、能耗高、纯度低、有机溶剂 消耗量大等问题，如果要达到进一步纯化的目的往往需要昂贵的仪器设备， 而且费用昂贵，因此更为有效的中药有效成分提取纯化的新方法开发尤为 重要。分子印迹技术是一种基于分子识别基础上的分子印迹聚合物的制备 过程，得到的分子印迹聚合物内部具有和模板目的分子互补的空间结构和 功能基团，具有记忆和识别功能，对模板目的分子有特异选择性。分子印 迹聚合物具有选择性好、耐酸碱、耐有机溶剂、可重复使用等特点，具有 较广泛应用前景。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种制备大黄素分子印迹聚合物的方法，并提供 一种利用该聚合物作固相萃取固定相从中药粗提物中分离、富集、纯化大 黄素的方法。本发明通过以下的技术方案实现的，具体包括步骤如下：

1、大黄素分子印迹聚合物的制备

(1)将模板分子即大黄素、功能单体丙烯酰胺(AM)和交联剂乙二醇 二甲基丙烯酸酯(EDMA)按照摩尔比为1∶3.5～4.5∶20溶解在作为致孔 剂的丙酮溶液中，加入引发剂偶氮二异丁腈(AIBM)；

(2)超声混匀10min，然后将溶液倒入一个试管中，密封，通氩气 (或氮气)脱氧15min，将密封好的试管放入56～60℃的水浴中，恒温聚 合24h得到块状聚合物；

(3)将制得的聚合物进行研磨，过200目筛，得到粒径为小于74μm 颗粒。

(4)用甲醇∶醋酸(8∶1～8∶3)混合液为萃取剂，通过索式提取洗 去模板分子及没有聚合的功能单体及交联剂，以紫外光谱进行检查，然后 用甲醇除去残留的醋酸；

(5)将除去模板分子的聚合物在60℃干燥24h，获得大黄素的分子印 迹聚合物。

(6)非印迹聚合物的制备方法，除不加入模板分子外，其余步骤同上。

2、固相萃取分离纯化中药粗提液中的大黄素

(1)称取中药虎杖或大黄5g，加人20％硫酸10mL，加人60％乙醇水 6ml溶液，用超声波超声45分钟后，用150mL氯仿分三次萃取，将提取液 旋转蒸发除去溶剂后在真空干燥箱中干燥，得到大黄素粗提物，备用。

(2)将上述得到的大黄素分子印迹聚合物采用干法装柱填充到固相萃 取柱中，用甲醇溶液淋湿柱子后，上层加入少量的石英砂。

(3)将虎仗或大黄粗提物溶解于甲醇中，上样后用氯仿淋洗固相萃取 柱，用点板检查确定杂质被完全洗脱除去后，用甲醇∶醋酸(8∶2)洗脱 保留在萃取柱中的大黄素，将洗脱液收集并浓缩、干燥，即得到高纯度的 大黄素。

本发明制备的分子印迹聚合物具有多孔的表面结构，对大黄素具有很好 的识别性能，作为固相萃取的填料，可用于中药中大黄素成分的高效分离、 富集及纯化。

具体实施方式

下面对本发明的实施例作详细说明：本实施例在以本发明技术方案为前 提下进行实施，给出了详细的实施方案和具体的操作过程，但本发明的保 护范围不限于下述的实施例。

实施例1：

1、大黄素分子印记聚合物的制备