[发明专利]健脑补肾制剂的含量测定方法

说明书

技术领域

本发明提供一种中药制剂的含量测定方法，尤其是健脑补肾制剂的含量 测定方法。

背景技术

目前临床应用的健脑补肾中成药的剂型主要以口服液或者传统丸剂的形式 提供药用。已有的健脑补肾口服液(健脑补肾口服液为中药成方制剂第16册收 载，标准号WS3-B-2209-96)的质量标准中只是对人参药材进行了简单的鉴别， 这种鉴别也只是简单的定性制剂中是否含有人参，而含量多少则无法确定，除 此以外，没有对任何成分进行含量和限度测定。

健脑补肾制剂成分复杂，多达25味不同药材，有很多成分从本领域技术人 员公知的常识角度是可以检测的，例如，乙醇回流提取的5味药材中的人参可 以采用比色法、薄层扫描法、高效液相色谱法法、GLC法测定人参皂苷或人参 皂苷元的含量；鹿茸可以采用紫外分光光度法测定鹿茸酸性多糖的含量，或者 采用高效液相色谱法测定碱基的含量；肉桂可以采用容量法及高效液相色谱法 测定其中的桂皮醛及肉桂酸的含量；砂仁采用气相色谱法测定挥发性成分的含 量，或者重量法测定挥发油的含量等等。

针对水提的20味药材的提取物，理论上可以检测的包括牛蒡子，采用用高 效液相色谱法或者TLCS法测定牛蒡甙及甙元含量；金银花采用高效液相色谱 法测定绿原酸、咖啡酸含量；连翘采用高效液相色谱法测定连翘甙和连翘脂素， 或者薄层扫描法测定齐墩果酸以及熊果酸；酸枣仁采用薄层层析法测定白桦脂 酸的含量，或者采用紫外分光光度法测定酸枣皂甙的含量；当归采用高效液相 色谱法测定阿魏酸的含量；茯苓采用高效液相色谱法测定去氢茯苓多糖的含量， 或者比色法测定茯苓多糖的含量；白芍采用高效液相色谱法测定芍药苷含量； 白术采用GC法测定苍术酮、高效液相色谱法测定苍术醇苷III、GC-MS法测 定苍术酮、脱水羟基苍术内酯、苍术内酯、羟基苍术内酯等等。

这些虽然都是本领域技术人员公知或者从现有文献中可以查阅到的，但是 在实际应用中确完全不同，并不是简单的理论套用就可以轻而易举的实现。有 些根本不用实验，采用现有的理论推理计算即可以被轻而易举的否定，例如川 牛膝药材中齐墩果酸、熊果酸，健脑补肾制剂中的川牛膝采用的水提取工艺， 而齐墩果酸和熊果酸均为脂溶性物质，水溶液中溶解度很低，在水提工艺中， 其转移率不足10％左右，再加上川牛膝药材中齐墩果酸和熊果酸本身含量就偏 低，只有不足0.1％，所以在健脑补肾制剂成品中含量极低几乎无法有效检测。 还有如连翘药材中连翘苷，在健脑补肾制剂中连翘药材所占处方量很小，药材 转移率即使按照100％折算，根据药典的方法，其取样量需要7g，这么大的取样 量，在实际操作中很难实现，因此测定该成分根本没有实际意义。

靳维荣、高国敬等人在2006年02期《时珍国医国药》中曾发表过采用高 效液相色谱(HPLC)法测定健脑补肾丸中绿原酸含量的方法，用以控制健脑补肾 丸的质量；本发明人重现了该方法，具体如下：

测定方法：采用高效液相色谱法

色谱条件：色谱柱：C18柱；检测波长：327nm；流动相：乙腈-0.4％磷酸 (13∶87)。

对照品以及溶液的制备：绿原酸购买自由中国药品生物制品检定所，纯度 为供含量测定用；取绿原酸对照品适量，用50％甲醇制成适当浓度对照品溶液。

供试品制备方法：称取健脑补肾制剂适量，精密加入50％甲醇50ml，称重， 超声处理30分钟，称重，用50％甲醇补足损失的量，过滤，进样测定。

结果绿原酸出峰时间较靠前，没有达到完全基线分离。调整流动相比例为： 乙腈-0.4％磷酸(10∶90)，仍然没有改变出峰时间。