[发明专利]多核苷酸构建体、药物组合物以及靶向的下调血管生成和抗癌的治疗方法

说明书

本申请是优先权日为2001年10月19日、申请日为2002年5月1 日、申请号为02824547.4的进入中国国家阶段的PCT申请 (WO03/033514)的分案申请。

发明背景和领域

本发明涉及核酸构建体、药物组合物和用于在受试者特异组织区 域中下调血管生成的方法。更具体地说，本发明涉及可用于在特定的 细胞亚群中激活编程性细胞死亡的核酸构建体，从而能够治疗以过度 或异常新血管生成或以细胞生长为特征的疾病。

血管生成指新血管的生长，是一个主要依赖于毛细血管内皮细胞 的移动、增殖和脉管形成的过程。在血管生成期间，内皮细胞从平静 状态中苏醒并迅速增殖。虽然负责细胞转变为血管生成表型的机制未 知，但导致新脉管形成事件的次序已有充分的文献记载[Hanahan，D.， Science 277，48-50，(1997)]。血管的生长需要内皮出芽[Risau，W.， Nature 386，671-674，(1997)]或套迭[Patan，S.，等；Microvasc. Res.51，260-272，(1996)]。在第一途径中将有下述事件发生：(a)脉 管基础，通常是后毛细管小静脉和间质溶解；(b)内皮细胞向刺激物 迁移；(c)尾随前导内皮细胞之后的内皮细胞增殖；(d)在内皮阵列 /芽中形成腔(管道化)(e)通过芽的融合性吻合形成分支和回路以 使血液流动；(f)外膜细胞(即，外周内皮细胞和平滑肌细胞)包被上 述脉管；和(g)形成包围不成熟脉管的基底膜。还可以通过第二途径 形成新脉管：即间质组织柱插入预先形成的脉管腔内。这些柱随后的 生长和稳定化导致脉管腔的分割和局部血管网的重塑。

有多种血管生成因子控制血管生成过程。当然，在病变期间，原 血管生成因子和抗血管生成因子之间的精密调节平衡被破坏，引起非 自限的内皮和外周内皮细胞增殖。直到最近，对在眼新血管生成、关 节炎、皮肤病和肿瘤疾病中出现的血管生成仍难以进行治疗性抑制。

因此，所有抗血管生成治疗的基本目标是使增殖微血管的病灶回 复到正常的静止状态，并阻止其再生长[癌症：肿瘤学理论与实践， 第五版Vincent T.DeVita，Jr.，Samuel Hellman，Steven A. Rosenberg编Lippincott-Raven出版，费城(1997)]。

鉴于其可延缓肿瘤(例如，视网膜病、良性的和恶性的血管生成 性肿瘤)级数生长，抗血管生成治疗是强有力的临床方法。

总的说来，任何一种由非受控毛细血管生长引起的疾病，如糖尿 病性视网膜病、牛皮癣、关节炎、血管瘤，肿瘤生长和转移都是抗血 管生长治疗的靶子。

例如，实体瘤的渐进生长超过临床上的潜伏大小(例如，几mm³)需 要连续的新血管形成，即已知的肿瘤血管生成过程。肿瘤生长和转移 是血管生成-依赖性的。肿瘤必须连续地刺激新微血管的生长以传递 营养和氧供肿瘤自身生长。因此，抗血管生成肿瘤治疗的基础在于阻 止肿瘤血管生成或者选择性地破坏肿瘤中已存在的血管(血管靶向疗 法)。

最近，已开发出许多抗血管生成药剂来治疗恶性疾病，其中一些 药剂已在进行临床试验(参见Herbst等(2002)Semin.Oncol.29： 66-77)。

研究得最多的用于肿瘤抗血管生成治疗的目标是在人体中调节血 管生成的主导过程，即血管内皮生长因子(VEGF)与其受体(VEGFR)之 间的相互作用。调节VEGFR的原-血管生成作用的试剂包括(i)针对 VEGF蛋白本身或其受体(例如，rhuMAb VEGF)的抗体；(ii)针对VEGFR 酪氨酸激酶的小分子化合物(例如，ZD6474和SU5416)；(iii)靶向 VEGFR的核酶。

其他新的血管生成抑制剂包括具有独特的抗肿瘤和抗血管生成特 性的雌二醇的天然代谢产物2-甲氧雌二醇(2-ME2)，以及分别作为 纤维蛋白溶酶原和胶原XVIII的蛋白水解切割片段的血管生长抑素和 内皮生长抑素。