[发明专利]一种改进的线粒体基因组全序列测定方法无效
| 申请号： | 200910138177.7 | 申请日： | 2009-04-30 |
| 公开（公告）号： | CN101875966A | 公开（公告）日： | 2010-11-03 |
| 发明（设计）人： | 尹绍武;齐兴柱;陈国华;张本;骆剑;霍蕊 | 申请（专利权）人： | 海南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 570228 *** | 国省代码： | 海南;66 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 改进 线粒体 基因组 序列 测定 方法 | ||
【权利要求书】：
1.建立在常规PCR技术基础上的一种改进的线粒体基因组全序列测定方法，包括如下步骤：1)模板的筛选；2)引物的设计；3)总DNA提取、PCR扩增及测序；4)测序结果的序列拼接。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：筛选分类学上属于同一个科的物种线粒体基因组全序列作为模板，其与待测序列同源性75％以上即可。
3.根据权利要求1和2所述的方法，其特征在于：利用Primer Premier 5.0软件进行引物设计，软件Primer Premier 5.0在软件网http://www.premierbiosoft.com/下载，引物设计分2批进行，第一批引物数目为总引物数目的一半，相邻两对引物扩增片段之间的间隔距离为1000-1200bp。
4.根据权利要求1和2所述的方法，其特征在于：第一批引物的PCR产物测序结果与引物设计所用模板经blast软件比较后取代模板序列中相应部位的原有序列。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：以得到的镶嵌有新序列的序列为模板进行第二批引物设计，而且，第二批引物中，每一对引物都必须落在新序列中，而且保证第二批引物的每段PCR产物与模板中的新序列都有一段50-100bp重叠。
6.根据权利要求1和3所述的方法，其特征在于：对于PCR扩增效果不好引物，在其外侧再引入一对PCR引物，进行镶嵌PCR扩增。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于海南大学，未经海南大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/200910138177.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：用于检验油箱排气阀的功能性的方法
- 下一篇：使飞翔物件飞翔的游戏程序
