[发明专利]提高骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化能力的培养方法无效
申请号: | 200910154617.8 | 申请日: | 2009-11-19 |
公开(公告)号: | CN101892195A | 公开(公告)日: | 2010-11-24 |
发明(设计)人: | 王金福;石东燕 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;冷红梅 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 提高 骨髓 间充质 干细胞 细胞 分化 能力 培养 方法 | ||
1.一种提高模拟微重力环境下骨髓间充质肝细胞向成骨细胞分化能力的培养方法,所述方法包括:将稳定传代的骨髓间充质干细胞接种至直径90~150μm的塑料微载体上,血清饥饿10~15小时后,用预处理培养液预处理1~3小时,然后在模拟微重力环境下用成骨诱导液进行诱导培养14~28天;
所述预处理培养液终浓度组成如下:
SB203580 1μmol/L
BMP-2 250ng/mL
FGF2 20ng/mL
5-aza-CdR 20μmol/L
溶剂为DMEM培养液;
所述成骨诱导培养液终浓度组成如下:
SB203580 1μmol/L
BMP-2 250ng/mL
FGF2 20ng/mL
5-aza-CdR 20μmol/L
胎牛血清 10%
地塞米松 50nmol/mL
β-磷酸甘油 10mmol/L
2-磷酸化抗坏血酸 50μmol/L
溶剂为DMEM培养液。
2.如权利要求1所述的方法其特征在于所述模拟微重力环境是指所述诱导培养在RMV生物反应器中、在16r/min转速条件下进行。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述血清饥饿是指将骨髓间充质干细胞置于不含血清的DMEM培养液中进行培养。
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