[发明专利]一种新型的熊果酸的制备方法

说明书

技术领域

本发明是关于一种新型的熊果酸的制备方法，属于植物有效成分提取领域。

背景技术

枇杷Eriobotrya japonica(Thunb.)Lindl为蔷薇科枇杷属植物，是我国南方特产的常绿果树。枇杷原产于我国，主要分布于中南及陕西、甘肃、江苏、安徽、浙江、江西、福建、台湾、四川、贵州、云南等地。从枇杷叶中已分离出了多种功能成分，包括皂苷类化合物、三萜化合物、倍半萜类、有机酸类、多糖、维生素B、维生素C、黄酮类等。枇杷叶中三萜的类型有：1.熊果酸及以熊果酸为母核的三萜类化合物；2.齐墩果酸及以齐墩果酸为母核的三萜类化合物。目前，对枇杷叶三萜酸研究较多主要是熊果酸和齐墩果酸，三萜酸具有减肥、降血糖、抗癌、抗肿瘤、抗肝损伤、抗菌消炎和抗病毒等多种生物学活性，开发前景广阔，有望成为一种高效低毒的多用途新产品。

Noreen发现，枇杷叶的乙醇提取物对家兔有明显的降血糖作用。DeTommasi等用从枇杷叶甲醇提取物中得到的2α-羟基熊果酸和坡模酸，对遗传性糖尿病小鼠和正常小鼠均有很好的降血糖作用，其作用机理是化合物2α-羟基熊果酸、坡模酸刺激了Langerhan’B cells，随之释放大量的胰岛索而起到降血糖的作用。De Tommasi等进一步研究报道，甲醇提取物分离得到的三萜酸类及倍半萜烯化合物对糖尿病小鼠有明显的降血糖作用，其作用机制可能是刺激胰腺B细胞，增加胰岛素的释放水平，从而达到降低血糖作用。王立为等研究了枇杷叶抗炎和止咳作用的有效成分，观察枇杷叶不同分离部分及单体成分的抗炎及止咳作用。动物实验研究表明，枇杷叶中的枇杷苷、乌苏酸、总三萜酸均能明显延长二氧化硫气体及枸橼酸喷雾所致豚鼠咳嗽的潜伏期，并明显减少咳嗽次数。Shoko Taniguchil1等研究表明，枇杷叶中的2α，19α-二羟基-3-o-乌苏酸具有抗HIV活性，从中提取的三萜酸类成分对EBV，EA病毒也显示活性。此外，枇杷叶的醋酸乙酯提取物对白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌、福式痢疾杆菌等均有抑制作用。枇杷叶中熊果酸还有护肝、抗氧化、增强免疫功能和毒性等作用。

熊果酸是枇杷叶中的重要成分。近年来大量的研究发现熊果酸对动物无明显毒、副作用，安全低毒，可将其作为抗氧化剂应用于医药和食品工业中，因此，开发利用熊果酸具有广阔的市场前景。常见的枇杷叶中熊果酸的提取方法有水提法和醇提法，已采用的分离纯化方法主要有活性炭脱色后调酸沉淀法、树脂富集化法和微滤纳滤等方法。

本发明的熊果酸的提取方法是采用一种新型的微波辅助旋转回流装置，用溶剂乙醇提取枇杷叶中的熊果酸，然后经除杂和脱色的工艺后，采用薄层层析的方法纯化，再经乙醇洗脱、浓缩、干燥得到熊果酸粉末。本发明所采用的微波辅助旋转回流装置能显著提高有效成分的提取率，节约了生产时间，后处理工序采用薄层层析法，能得到纯度高的产品，本发明将对熊果酸的生产和研究打下良好的基础。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种新型的熊果酸的制备方法。

本发明所说的新型的熊果酸的制备方法，是采用一种新型的微波辅助旋转回流装置，用溶剂乙醇提取枇杷叶中的熊果酸，然后经除杂和脱色的工艺后，采用薄层层析的方法纯化，再经乙醇洗脱、浓缩、干燥得到熊果酸粉末。

本发明的技术解决方案如下：

(1)微波辅助旋转回流提取装置的组装

在家用微波炉上壁打一圆孔，将旋转蒸发仪旋转器下端的硬质玻璃管从该圆孑L插入微波炉的炉膛中。在硬质玻璃管下端接圆底烧瓶，旋转器上端接导气瓶和冷凝管，并用铁夹固定冷凝管，即组成微波辅助旋转回流提取装置。

(2)提取

称取枇杷叶粉末，将其装入圆底烧瓶中并加入提取剂乙醇。将圆底烧瓶套于旋转器下端的硬质玻璃管上，开冷凝水，设定旋转器的转速，按微波炉旋转器的启动按钮，使圆底烧瓶旋转。微波提取，重复操作。提取完毕，依次关闭微波炉、旋转器和冷凝水。打开微波炉门，取下圆底烧瓶。合并3次提取液，过滤除去残渣，减压回收乙醇，得浸膏。

(3)纯化

将浸膏依次用石油醚、氢氧化钠水溶液、水洗至洗出液近无色，烘干。再用无水乙醇加热溶解，加活性炭脱色，滤过。用热乙醇反复洗涤残渣，合并滤液及洗液，蒸去部分乙醇，然后采用制备薄层分离，最后经乙醇洗脱，浓缩、干燥得熊果酸。

本发明采用了一种新型的微波辅助旋转回流装置，用溶剂乙醇提取枇杷叶中的熊果酸，然后经除杂和脱色的工艺后，采用薄层层析的方法纯化，再经乙醇洗脱、浓缩、干燥得到熊果酸粉末。与其他提取方法相比，微波辅助提取法具有提取时间短、溶剂消耗及废物产生量低、提取选择性和提取物的纯度高。通过旋转器的旋转不仅起到了搅拌、防止提取液暴沸的作用，而且使圆底烧瓶均匀受到微波能辐射，从而使原料更充分吸收微波能，进一步提高了提取率，缩短了反应时间。