[发明专利]从虎皮楠中分离提取两种双黄酮的方法无效
申请号: | 200910155221.5 | 申请日: | 2009-12-08 |
公开(公告)号: | CN101723953A | 公开(公告)日: | 2010-06-09 |
发明(设计)人: | 许明峰;沈莲清;王奎武 | 申请(专利权)人: | 浙江工商大学 |
主分类号: | C07D493/18 | 分类号: | C07D493/18 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 虎皮 分离 提取 双黄 方法 | ||
1.从虎皮楠中分离提取两种双黄酮的方法,其特征是包括以下步骤:
1)、将狭叶虎皮楠茎粉碎后,用乙醇回流提取;所得提取液经真空抽滤和减压浓缩,得浸膏;
2)、将浸膏分散于水中,得悬浮液;再将悬浮液用等体积的石油醚萃取,得石油醚萃取液和萃取后水相;
3)、所述萃取后水相用等体积的乙酸乙酯萃取,分层后得上层有机相和下层水相;
将上层有机相过滤,得乙酸乙酯萃取液;再将乙酸乙酯萃取液在减压真空条件下旋转蒸发浓缩,得到乙酸乙酯相浸膏;
4)、以石油醚与乙酸乙酯分别按1∶0、10∶1、10∶3、2∶1的体积比所得的混合液作为洗脱剂,依次对乙酸乙酯相浸膏进行梯度洗脱,分别对应获得洗脱液I、洗脱液II、洗脱液III和洗脱液IV;
以石油醚和乙酸乙酯分别按3∶2、1∶1的体积比所得的混合液作为洗脱剂,依次对上述洗脱液IV进行梯度洗脱,分别对应获得洗脱液IV-1和洗脱液IV-2;
5)、将洗脱液IV-2减压旋转蒸发溶剂,得淡黄色粉末状固体;再将上述淡黄色粉末状固体用制备型HPLC进一步分离纯化,得双黄酮A和双黄酮B。
2.根据权利要求1所述的从虎皮楠中分离提取两种双黄酮的方法,其特征是:所述步骤5)的分离纯化的条件如下:
JAI LC-9103制备型液相,JAIGEL ODS-BP-30,30.0×250mm液相柱,流动相梯度条件为:在第0-5min,甲醇-水体积比为20∶80;在第6-10min,甲醇-水体积比为50∶50;第11-30min,甲醇-水体积比为70∶30;流速:10mL/min;在12.5和17分钟的出峰时间,分别得双黄酮A和双黄酮B。
3.根据权利要求1或2所述的从虎皮楠中分离提取两种双黄酮的方法,其特征是:所述步骤2)中,浸膏与水的质量/体积比为:1g/2~3ml。
4.根据权利要求3所述的从虎皮楠中分离提取两种双黄酮的方法,其特征是:所述步骤1)中,狭叶虎皮楠茎与乙醇的质量/体积比为:1g/2~3ml。
5.根据权利要求4所述的从虎皮楠中分离提取两种双黄酮的方法,其特征是:所述步骤1)中用乙醇回流提取至少2次,合并每次提取所得的提取液经真空抽滤和减压浓缩,得浸膏。
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