[发明专利]从虎皮楠中分离提取两种双黄酮的方法

说明书

技术领域

本发明属于有机化合物提取领域，尤其是涉及一种虎皮楠科植物即狭叶虎皮楠的提取物——双黄酮A和双黄酮B的制备方法。

背景技术

双黄酮A的化学名为5，7，14三羟基黄烷(2→O→7，4→8)3′，5′，14′-三羟基黄酮醇，双黄酮B的化学名为5，7，14三羟基黄烷醇(2→O→7，4→8)3′，5′，14′-三羟基黄酮醇，其结构式如下：

双黄酮A为淡黄色粉末，M.p.264-266℃，ESI-MS(negative mode)：m/z＝539[M-H]^-。结合NMR数据确定分子式为C₃₀H₂₀O₁₀，不饱和度为21。该化合物遇FeCl₃显色剂显蓝色，说明分子中含有酚羟基，在254nm紫外灯下和碘蒸汽中均能显色。紫外光谱显示该化合物在350.60，245.50，212.50nm处有吸收。红外光谱有酚羟基的伸缩振动(3378cm^-1)，羰基伸缩振动(1613cm^-1)，苯环的特征吸收(1654cm^-1，1515cm^-1，1491cm^-1)，苯环CH面外弯曲振动(1254cm^-1，1160cm^-1，833cm^-1)，C-O-C伸缩振动(1136cm^-1)。

双黄酮B为淡黄色粉末，M.p.239-241℃，ESI-MS(negative mode)：m/z＝555[M-H]^-。结合NMR数据确定分子式为C₃₀H₂₀O₁₁，不饱和度为21。双黄酮B遇FeCl₃显色剂显蓝色，说明分子中含有酚羟基，在254nm紫外灯下和碘蒸汽中均能显色。紫外光谱显示双黄酮B在283.5，323.5nm处有吸收。红外光谱有酚羟基的伸缩振动(3260cm^-1)，羰基伸缩振动(1638cm^-1)，苯环的特征吸收(1614cm^-1，1515cm^-1，1458cm^-1)，苯环CH面外弯曲振动(1274cm^-1，1160cm^-1，816cm^-1)，C-O-C伸缩振动(1115cm^-1)。

狭叶虎皮楠Daphniphyllum angustifolium Hutch.为虎皮楠科Daphniphyllaceae植物，该科植物在传统中药中主要有愈合和消炎的作用，可以用来治疗哮喘、风湿、发热、流行性感冒，蛇咬伤等，在现代的临床运用中可以有治疗肠胃炎、促进消化、治疗湿疹等作用，但同时也是一种毒药，所以对它化学成分的研究具有重要意义。狭叶虎皮楠：常绿小乔木，主要分布在湖北和四川等地；生于海拔1600～2300m的阔叶林中，习见速生树种，花期4月，果期10～11月。

目前还没有从狭叶虎皮楠中提取双黄酮A和双黄酮B的报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种工艺简洁、收率高的从虎皮楠中分离提取两种双黄酮的方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种从虎皮楠中分离提取两种双黄酮的方法，包括：

1)、将狭叶虎皮楠茎粉碎后，用乙醇回流提取；所得提取液经真空抽滤和减压浓缩，得浸膏；

2)、将浸膏分散于水中，得悬浮液；再将悬浮液用等体积的石油醚萃取，得石油醚萃取液和萃取后水相；

3)、所述萃取后水相用等体积的乙酸乙酯萃取，分层后得上层有机相和下层水相；

将上层有机相过滤，得乙酸乙酯萃取液；再将乙酸乙酯萃取液在减压真空条件下旋转蒸发浓缩，得到乙酸乙酯相浸膏；

4)、以石油醚与乙酸乙酯分别按1∶0、10∶1、10∶3、2∶1的体积比所得的混合液作为洗脱剂，依次对乙酸乙酯相浸膏进行梯度洗脱，分别对应获得洗脱液I、洗脱液II、洗脱液III和洗脱液IV；

以石油醚和乙酸乙酯分别按3∶2、1∶1的体积比所得的混合液作为洗脱剂，依次对上述洗脱液IV进行梯度洗脱，分别对应获得洗脱液IV-1和洗脱液IV-2；