[发明专利]一种罗莫肽的合成方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种罗莫肽的合成方法，属于生物技术领域。

(二)背景技术

罗莫肽相关信息如下：

中文名：N²-(N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-异谷氨酰胺)-N⁶-硬脂酰-L-赖氨酸

英文名：romurtide

商品名：Nopia(Daiichi Sankyo)

日文名：ロムルチド

其他名称：DJ-7041/MDP-LYS-L₁₈/muroctasin

CAS：78113-36-7

分子式：C₄₃H₇₈N₆O₁₃

化学名：

N²-[N²-[N-(N-acetylmuramoyl)-L-alanyl]-D-alpha-glutaminyl]-N⁶-(1-oxooctade cyl)-L-Lysine

结构式：

类别：生物反应调节剂。

罗莫肽为一免疫调节药，是几种细胞因子如IL-1、IL-6、CSF和IFN的强诱 导剂，亦可促使骨髓中造血干细胞的增殖与分化使外周血中白细胞和血小板的 计数增多。升高辅助性T细胞活性，激活中性粒细胞功能，增强对感染的非特 异性抵抗力，增强抗生素的疗效。

罗莫肽不但刺激单核一巨噬细胞产生造血细胞因子，刺激骨髓干细胞增殖分 化，增加血小板、中性粒细胞和单核细胞数目，并激活其功能，进而增强机体 抵御各种病原体感染的能力，特别是对那些接受抗癌化疗和/或放疗引起的白 细胞减少的病人抗感染就更为有利。罗莫肽还具有抑制肿瘤转移的作用，所以， 不仅可以作为细胞因子诱导剂用于肿瘤病人的支持治疗，而且还有望作为直接 治疗某些感染和肿瘤的药物。

目前，罗莫肽药品只有在日本上市，美欧均没有上市，市场前景广阔。

现有技术：有关罗莫肽的合成文献EP002367和US4317771中，均采用全液 相的合成方式，肽段部分的合成采用N-叔丁氧羰基-丙氨酸、D-异谷氨酰胺苄酯 和N⁶-苄醚-赖氨酸苄酯作为原料，以三氟乙酸和钯碳催化剂为脱保护试剂，DCC 和HOSu为缩合试剂。这些方法在技术上存在着一些不足，主要表现为：(1) 全液相合成周期长，中间体纯化操作繁琐；(2)反复使用贵重金属钯为催化剂， 成本高昂；(3)合成所得粗产品纯度低，对于水溶性和脂溶性都很差的罗莫肽 而言，不易得到纯度高的终产品，即便得到，收率也极低。因此研发罗莫肽制 备的新方法十分需要。

(三)发明内容

本发明所要解决的问题是克服现有技术的不足之处，提供一种操作简单， 合成周期短，反应收率高，纯度好，产品质量高的罗莫肽合成新方法。

本发明采用的技术方案是：

一种罗莫肽的合成方法，所述方法包括如下步骤：

(1)液相合成全保护单糖中间体RMT III：N-乙酰保护胞壁酸；

(2)固相合成肽段Fmoc-Ala-D-iso-Gln(Trt)-Lys(Boc)-Wang；

(3)固相合成糖肽：Fmoc-Ala-D-iso-Gln(Trt)-Lys(Boc)-Wang在HOBt 和DIC存在下与中间体RMT III反应，制得式(1)所示的RMTIII -Ala-D-iso-Gln(Trt)-Lys(Boc)-Wang，RMTIII-Ala-D-iso-Gln(Trt) -Lys(Boc)-Wang用K试剂进行切割，得到MTP的TFA盐；

(4)液相连接脂肪长链：MTP的TFA盐与硬脂酸N-羟基琥珀酰亚胺酯在 DIPEA作用下讲行反应，制得RMT粗品；

MTP的TFA盐与硬脂酸活化酯溶于DMF中，在DIPEA的作用下反应 生成RMT，并从反应液中析出，收集RMT固体，简单纯化后用于下步凝胶 柱纯化。

(5)纯化：将RMT粗品用凝胶柱纯化，得到所述罗莫肽。