[发明专利]棘孢木霉及在合成(R)-[3,5-双(三氟甲基)苯基]乙醇中的应用

说明书

(一)技术领域

本发明属于生物催化技术领域，涉及一株新的菌种——棘孢木霉(Trichoderma asperellum)ZJPH0810，及其在微生物催化不对称合成(R)-[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙醇中的应用。

(二)背景技术

含芳香基的手性醇是多种手性药物合成的关键手性中间体。阿瑞吡坦(Aprepitant)，商品名：Emend，化学名称：5-[[(2R，3S)-2-[(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)-4-吗啉基-]甲基]-1，2-二氢-3H-1，2，4-三氮唑-3-酮基。2003年美国食品和药物管理局(FDA)批准阿瑞吡坦用于高度致吐化疗方案所致恶心、呕吐的药物，它是一个全新机制的镇吐药物-NK-1受体拮抗剂。NK-1受体拮抗剂对各种致吐刺激具有广泛的镇吐作用，且在迟发性呕吐中作用突出。阿瑞吡坦是目前唯一应用于临床的NK-1受体拮抗剂。此外，阿瑞吡坦还具有治疗抑郁及其他精神疾病的作用。阿瑞吡坦与5-HT₃受体拮抗剂、地塞米松合用被列为高致吐化疗和延迟性呕吐的标准药物治疗方案。目前，阿瑞吡坦被认为是效果最好的化疗后止吐药之一。(R)-[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙醇是阿瑞吡坦合成的关键手性中间体，获得对映体纯的1-[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙醇是合成阿瑞吡坦的关键步骤之一。

采用传统的化学法制备(R)-[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙醇，需要使用价格昂贵的金属催化剂，如铑、钌等，而且会对环境造成污染。利用生物法制备(R)-[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙醇具有反应条件温和、立体选择性高、环境友好等优点。

目前，文献报道的生物法催化合成(R)-[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙醇主要有以下几种：

法国罗地亚有限公司的Gelo-Puji等(Microbial and homogenousasymmetric catalysis in the reduction of 1-[3，5-bis(trifluoromethyl)phenyl]ethanone[J].Tetrahedron：Asymmetry，2006，17：2000-2005)报道了采用开菲尔乳杆菌(Lactobacillus kefir)和黑曲霉(Aspergillusniger)可还原[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙酮得到(R)-[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙醇，其中以开菲尔乳杆菌(Lactobacillus kefir)转化[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙酮时，底物初始浓度为5mmol/L，反应16小时的产率为100％，ee值大于99％；当底物浓度提高到50mmol/L，反应16小时后产率仅为13％；底物浓度增至200mmol/L时，反应16小时的产率为2％，延长反应时间到96小时后，产率为31％。因该菌种只在底物浓度偏低时才能获得较高的产率，不适合工业化应用。

印度Vankawala 等(Efficient Synthesis of(1R)-[3，5-Bis(trifluoromethyl)phenyl]Ethanol，a Key Intermediate forAprepitant，an NK-1 Receptor Antagonist[J].Synthetic Communications，2007，37：3439-3446)报道了以外消旋的[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙醇为底物，乙烯醋酸酯作为酰基受体，通过南极假丝酵母脂肪酶(Candidaantarctica lipase-B，CAL-B)催化(R)-[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙醇生成(R)-[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙酸乙酯，而外消旋体中的S-型醇不发生反应，继而再用盐酸水解(R)-[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙酸乙酯可得到(R)-[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙醇，产率为84％，ee值大于99％，反应式如下：

(三)发明内容

本发明目的是提供一株新的菌种——棘孢木霉(Trichodermaasperellum)ZJPH0810，及其在微生物催化不对称合成(R)-[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙醇中的应用。

本发明采用的技术方案是：

棘孢木霉(Trichoderma asperellum)ZJPH0810，保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国武汉武汉大学，430072，保藏日期：2009年12月16日，保藏编号：CCTCC NO：M 209307。