[发明专利]脐带华通胶间充质干细胞的制备方法及其产品

权利要求书

1.一种原始间充质干细胞的制备方法，其特征在于，其工艺方法为：取人 新鲜脐带，以等渗的平衡盐溶液或无血清培养基溶液洗去脐带残留血液，去除脐 动脉、脐静脉及脐带外膜，提取华通胶并剪切成块，再以等渗的平衡盐溶液或无 血清培养基溶液冲洗后，浸泡于0.05～0.3％胶原酶溶液中，置35～37.5℃温箱 中10～30小时，组织块消化，液体呈粘稠状，然后加入相当于原液1～10倍量的 含胎牛血清培养基终止消化，分装于培养瓶或培养皿，置CO₂培养箱，待细胞贴 壁后更换含胎牛血清的培养基溶液，以后每隔2～4天换液一次，细胞贴壁融合后 传代培养；传代培养2～4代，即时使用或冷冻保存备用。

2.根据权利要求1所述的原始间充质干细胞的制备方法，其特征在于，用 于清洗残血和冲洗华通胶组织块的等渗平衡盐溶液是D-Hank平衡液、0.9％氯化 钠溶液、磷酸盐缓冲液中任何一种。

3.根据权利要求1所述原始间充质干细胞的制备方法，其特征在于，用于 消化华通胶组织块的胶原酶为I～IV型胶原酶中任何一种。

4.根据权利要求1所述原始间充质干细胞的制备方法，其特征在于，细胞 培养基中胎牛血清的浓度为5～30％。