[发明专利]大规模生产辣椒核雄性不育植株的方法

说明书

技术领域

本发明主要涉及一种利用植物组织培养技术大规模生产辣椒核雄性不育两用系不育株的方法，特别涉及一种提高再生植株数量的方法。

背景技术

辣椒是一种十分重要的茄果类蔬菜，它不仅被大量用作调味品，还被开发用于健康食品和药物。辣椒杂交优势十分明显，用核雄性不育两用系做母本生产杂交一代种子是辣椒杂交优势利用的主要手段，用辣椒核雄性不育两用系做母本进行杂交辣椒的生产，播种的辣椒核雄性不育两用系中有50％的可育株，需要在花期拔除所有的可育株，有时因为拔除可育株不完全，容易造成杂交种子的纯度低。

到目前为止，用于制种的辣椒核雄性不育两用系的不育株主要还是通过在花期将核雄性不育两用系中的50％的可育株拔除而获得，需要花费大量的人力；另外获得用于制种的辣椒核雄性不育两用系的不育株也有通过叶片等进行组织培养获得再生植株，但辣椒通过叶片等进行组织培养获得再生植株难度十分大，且变异比较严重，不具备实用性；还有一种获得用于制种的辣椒核雄性不育两用系不育株的方法是通过扦插繁殖的方式，但扦插繁殖的繁殖系数小，多代繁殖还有退化的现象。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，利用植物组织培养技术，提供一种大规模生产辣椒核雄性不育植株的方法。

本发明通过下列技术方案完成：一种大规模生产辣椒核雄性不育植株的方法，它包括下述步骤：

A、由辣椒核雄性不育两用系不育株带腋芽的茎段，接种在腋芽诱导培养基上，在人工控制的环境条件下，诱导腋芽的萌发伸长，形成丛生苗；

B、由丛生苗分割成带腋芽的茎段，接种在腋芽诱导培养基上，在人工控制的环境条件下，诱导腋芽的萌发伸长，形成次级丛生苗；

C、在相同的条件下，通过重复的继代培养扩增丛生苗；

D、分割丛生苗，接种到不定根诱导培养基上，在人工控制的环境条件下，诱导不定根的形成；

E、选取生根多且健壮的植株去掉封口膜炼苗7~10d，然后洗净根系上的培养基，移入含有珍珠岩和草炭土混合基质的营养钵并置于温室中，用塑料薄膜覆盖，5d后逐步揭去薄膜通风，增加光照，及时补足营养钵水分，15~20d后将营养钵移至露地，10~15d后将幼苗移到大田中。

本发明所说的丛生苗是在一个苗扩增培养基上通过重复继代培养大规模扩增生产的。

所说A、B、C步骤中的腋芽萌发生长至具有4个以上节的丛生苗，丛生苗切割成具有单个节的茎段，将各个茎段移入腋芽诱导培养基，并在该培养基上进行腋芽诱导培养，通过重复的茎段切割诱导培养来扩增丛生苗，将形成的丛生苗切割成单株，将各个单株移入不定根诱导培养基，并在此培养基上进行不定根的诱导，形成完整的再生植株。

所述的E步骤的混合基质中珍珠岩与草炭土体积比为：1∶1~2∶1。

所说的腋芽诱导培养基为：MS基础培养基，并在该培养基中添加质量比为3％的蔗糖、0.6％的琼脂，0.5~2.0％的苄基腺嘌呤，和0.01~0.1％的a-萘乙酸，控制培养基pH 5.8，在121℃下灭菌20min。

所说的丛生芽不定根诱导培养基为：1/2MS基础培养基，其中亚铁盐的含量与MS培养基相同，在1/2MS基础培养基中还含有质量比为3％的蔗糖，0.6％的琼脂，0.02~0.1％的a-萘乙酸，和0.02~0.1％的吲哚丁酸，控制培养基pH 5.8，于121℃下灭菌20min。

所说的人工控制的环境条件为：每天连续光照12~14h，温度24~26℃，光照强度40~50umol.m^-2.s^-1。

和现有技术相比，本发明有如下优点或积极效果。

1、利用腋芽再生植株，接种材料不需要经过脱分化和再分化的过程，产生的再生植株性状稳定、一致。

2、所接种的材料已经有带有腋芽，在培养时只需腋芽的萌发，技术难度较小。

3、通过将再生植株分割成带腋芽的茎段进行扩繁，繁殖系数大，每年能够产生大量的再生植株。

4、所获得的植株都为雄性不育株，栽入大田后不需筛选可育株的过程，可以直接用于杂交制种。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

辣椒核雄性不育两用系2003A大田植株的大规模组织培养，其步骤是：

1.将市购的辣椒核雄性不育两用系2003A种植于露地农田中；