[发明专利]一种β-内酰胺酶的检测方法及检测试纸有效
申请号: | 200910164859.5 | 申请日: | 2009-08-11 |
公开(公告)号: | CN101993910A | 公开(公告)日: | 2011-03-30 |
发明(设计)人: | 李苌清;孙明杰;王霆 | 申请(专利权)人: | 广州威尔曼新药开发中心有限公司 |
主分类号: | C12Q1/34 | 分类号: | C12Q1/34 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 逯长明 |
地址: | 510075 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 内酰胺 检测 方法 试纸 | ||
1.一种β-内酰胺酶的检测方法,包括以下步骤:
步骤(1):将可能含微生物的样本培养2-24小时;
步骤(2):用产色头孢菌素法对样本进行β-内酰胺酶的检测。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,还包含步骤(3):用底物优势结合法检测所述β-内酰胺酶的底物特性。
3.根据权利要求1所述的检测方法。其特征在于,步骤(1)所述培养是在16℃-38℃、50-300rpm条件下培养。
4.根据权利要求1所述的检测方法。其特征在于,步骤(1)加入抑制微生物生长的药物进行选择性培养。
5.根据权利要求4所述的检测方法。其特征在于,所述药物为青霉素、阿莫西林、青霉素G钾、青霉素G钠、长效西林、苯唑青霉素、氯唑青霉素、氨苄青霉素、羟氨苄青霉素、羧苄青霉素、氧哌嗪青霉素、呋苄青霉素、美西林、匹美西林、头孢噻吩、头孢噻唑、头孢唑林、头孢乙腈、头孢匹林、头孢替唑,头孢来星、头孢氨苄、头孢羟氨苄、头孢拉定、头孢曲嗪、头孢沙定、头孢克洛、氯碳头孢,头孢孟多、头孢替安、头孢尼西、头孢呋辛、头孢西丁中的一种或两种以上的组合。
6.根据权利要求4或5所述的检测方法。其特征在于,所述药物浓度为0.5~32ug/ml。
7.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于,步骤(3)使β-内酰胺酶优先结合待检底物,再与显色底物结合显色,所述检测底物的浓度为所述显色剂浓度的10倍以上。
8.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于,所述待检底物为青霉素类抗生素、第一代头孢菌素、第二代头孢菌素、第三代头孢菌素、第四代头孢菌素、青霉烯类抗生素、单环β-内酰胺类抗生素、金属离子螯合剂、氯唑西林中的一种或任意两种以上的组合。
9.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于,所述显色底物包括头孢硝噻吩及其生理上可以接受的盐,以及头孢硝噻吩的衍生物。
10.一种β-内酰胺酶检测试纸,包含以下部分:加样区、检测区、显色区;所述显色区含有显色底物;所述检测区含有待检底物。
11.根据权利要求10所述的β-内酰胺酶检测试纸,其特征在于,所述待检底物为青霉素类抗生素、第一代头孢菌素、第二代头孢菌素、第三代头孢菌素、第四代头孢菌素、青霉烯类抗生素、单环β-内酰胺类抗生素、金属离子螯合剂、氯唑西林中的一种。
12.根据权利要求10所述的β-内酰胺酶检测试纸,其特征在于,所述显色底物包括头孢硝噻吩及其生理上可以接受的盐,以及头孢硝噻吩的衍生物。
13.一种β-内酰胺酶检测多臂试纸,包含两条以上的权利要求10-12任一项所述β-内酰胺酶检测试纸,所述β-内酰胺酶检测试纸共用一个加样区。
14.根据权利要求13所述的β-内酰胺酶检测多臂试纸,其特征在于,每条试纸检测区含有的待检底物不相同。
15.一种β-内酰胺酶检测试剂盒,其特征在于,包含权利要求10-12任一项所述的β-内酰胺酶检测试纸。
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