[发明专利]亲水的高蛋白结合的低荧光蛋白质印迹膜有效
申请号: | 200910173382.7 | 申请日: | 2009-08-17 |
公开(公告)号: | CN101703923A | 公开(公告)日: | 2010-05-12 |
发明(设计)人: | A·彼得斯;P·戈达;J·查库迪安;N·索伊斯;D·布鲁斯特;A·德代奥 | 申请(专利权)人: | 米利波尔有限公司 |
主分类号: | B01J20/285 | 分类号: | B01J20/285;B01D71/06;B01D71/76 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 权陆军;付磊 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高蛋白 结合 荧光 蛋白质 印迹 | ||
1.一种由聚合基质膜和修饰所述聚合基质膜表面的交联聚合涂层组成的多 孔膜,其中所述交联聚合涂层由丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺使用自由基聚合 制备,且其中所述聚合基质膜由聚偏氟乙烯制备,其中所述涂层使所述表面成 为亲水性的,并且其中所述表面具有蛋白质结合能力,其通过IgG结合试验测 定为250-325μg/cm2。
2.权利要求1的多孔膜,其中所述多孔膜的平均总有机碳水平低于 1.5μg/cm2,并且其中由HPLC测定的可提取单体水平对于丙烯酰胺来说低于 0.02μg/cm2,对于亚甲基双丙烯酰胺来说低于0.15μg/cm2。
3.权利要求1的多孔膜,其中未修饰的聚合基质膜具有背景荧光值,并且 其中所述修饰的膜在同样测量条件下显示两倍于所述未修饰的聚合基质膜背景 荧光值的背景荧光。
4.权利要求1或3的多孔膜,其中单体反应物溶液中丙烯酰胺和亚甲基双 丙烯酰胺的比例为按质量计1∶1。
5.权利要求1或3的多孔膜,其中丙烯酰胺∶亚甲基双丙烯酰胺单体反应 物溶液中总的单体浓度在按质量计0.5%-1.5%之间。
6.一种制备亲水性、低背景荧光、高蛋白结合多孔膜的方法,所述膜包 含疏水、低背景荧光、高蛋白结合的多孔膜基质,以及低背景荧光表面修饰, 所述方法包括:
提供疏水、低背景荧光、高蛋白结合的多孔膜基质;
使所述多孔膜的表面与单体反应物溶液接触,所述溶液包含丙烯酰胺和亚 甲基双丙烯酰胺以及光引发剂;
从反应溶液中除去所述膜;除去过量的反应物溶液;
在无氧条件下将所述丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺反应物溶液直接聚合 至整个疏水多孔膜表面,形成连续的亲水低背景荧光背景涂层;以及
干燥所述膜。
7.权利要求6的方法,其中所述反应物溶液中丙烯酰胺和亚甲基双丙烯 酰胺的量分别为按重量计0.50%和0.40%。
8.权利要求6的方法,其中所述反应物溶液中的光引发剂为量为按重量 计0.10%的Irgacure 2959。
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