[发明专利]菜籽饼微生物脱毒方法

权利要求书

1.一种菜籽饼微生物脱毒方法，其特征在于，它包括下列步骤：

(1)扩大培养

将曲霉属中：烟曲霉(Asp.fumigatus)、棕曲霉(Asp.ochraceus)、黑曲霉(Asp.niger)、米曲霉(Asp.oryzae)、棒曲霉(Asp.clavatus)、黄曲霉(Asp.flavus)、萨氏曲霉(Asp.Sydwi)、白曲霉(Asp.caddidus)，毛霉属中：高大毛霉(Mucor muced)、总状毛霉(Mucor racemosus)、微小毛霉(Mucorpusillis)，青霉属中：产黄青霉(Pen.chrysogonum)、常现青霉(Pen.fregulutans)，根霉属中：米根霉(Rhi.oryzae)、葡枝根霉(Rhi.nigricans)、华根霉(Rhi.chinensis)，木霉属中：绿色木霉(Tri.virde)、康氏木霉(Tri.koningi)的试管斜面菌种在马铃薯固体培养基上进行三角瓶固态扩大培养，并分别用蒸馏水制成1.0×10¹¹～4.0×10¹¹个孢子/L的菌悬液；

(2)混合培养

将所述三角瓶扩大菌种在麸皮培养基上采用固态浅盘培养法混合培养后，20℃～30℃风干后即成菜籽饼脱毒菌剂；

(3)脱毒

将所述菜籽饼脱毒菌剂按重量kg/L的百分比，用自来水配制成1％～5％的溶液，然后拌入与该脱毒菌剂溶液等质量的菜籽饼粉中，用塑料薄膜覆盖，品温15℃～35℃堆积发酵3天～8天后，即可完成菜籽饼脱毒。

2.根据权利要求1所述的菜籽饼微生物脱毒方法，其特征在于，在所述扩大培养步骤中，将白地霉的试管斜面菌种在马铃薯固体培养基上进行三角瓶固态扩大培养，将枯草芽孢杆菌的试管斜面菌种在牛肉膏蛋白胨培养基上进行三角瓶液体扩大培养，将啤酒酵母、热带假丝酵母的试管斜面菌种在麦芽汁液体培养基上进行三角瓶液体扩大培养；在所述混合培养步骤中，将所述白地霉的三角瓶扩大菌种在麸皮培养基上采用固态浅盘培养法混合培养后，20℃～30℃风干，将所述啤酒酵母、热带假丝酵母和枯草芽孢杆菌的三角瓶扩大菌种在以玉米淀粉培养基上进行液体混合培养后，用吸附剂吸附、20℃～30℃风干，等质量混合加入所述菜籽饼脱毒菌剂。

3.根据权利要求1或2所述的菜籽饼微生物脱毒方法，其特征在于，所述霉菌的三角瓶扩大培养基按重量kg/体积L的百分比，为：去皮马铃薯20％～30％，葡萄糖1％～3％，琼脂1.5％～2％，用蒸馏水配制，初始pH值5.0～6.5，121℃高压灭菌15分钟～20分钟，培养条件为：25℃～35℃恒温培养24小时～108小时；所述枯草芽孢杆菌的三角瓶扩大培养基按重量kg/体积L的百分比，为：牛肉膏0.1％～0.5％，蛋白胨0.5％～1.5％，氯化钠0.1％～0.5％，用蒸馏水配制，初始pH值5.0～6.5，121℃高压灭菌15分钟～20分钟，培养条件为：摇床振荡25℃～35℃恒温培养24小时～108小时，转速为150～200r/min；所述酵母菌的三角瓶扩大培养基为：麦芽汁6°Bx～12°Bx，用蒸馏水配制，初始pH值5.0～6.5，121℃高压灭菌15分钟～20分钟；培养条件为：摇床振荡25℃～35℃恒温培养24小时～108小时，转速为150～200r/min。

4.根据权利要求1或2所述的菜籽饼微生物脱毒方法，其特征在于，所述霉菌混合培养的培养基成分按重量kg/体积L的百分比，为：麸皮30％～65％，玉米秸秆粉1％～7％，菜子饼粉10％～30％，过磷酸钙0.3％～1.5％，拌匀，用自来水配制；霉菌混合培养的条件为：各霉菌等量接种50～100mL/L，温度为20℃～35℃，相对湿度为50％～80％，培养时间为32小时～84小时，初始pH值为4.5～7.0；酵母菌和细菌混合培养的培养基成分按重量kg/体积L的百分比，为：玉米淀粉1％～4％，菜子饼粉0.5％～1％，玉米秸秆粉0.1％～0.5％，磷酸二氢钾0.05％～0.2％，搅匀，用自来水配制；酵母菌和细菌混合培养的条件为：50L发酵罐，等量接种50～100mL/L，温度为15℃～35℃，转速为50～150r/min，培养时间为32小时～84小时，初始pH值为4.5～7.0。