[发明专利]一种鸡新城疫浓缩冻干卵黄抗体复合制剂及其制备工艺

权利要求书

1.一种鸡新城疫浓缩冻干卵黄抗体复合制剂，其特征在于，它由以下重量份数的组分组成：

(1)抗鸡新城疫病毒卵黄抗体10.0-99.5；

(2)中药多糖0.5-20.0；

所述的中药多糖提取自下列重量份的中药中的一种或两种以上的组合物：板蓝根10-50、沙参50-100、丹参50-80、茯苓30-50。

2.权利要求1所述的复合制剂，其特征在于：进一步包含常规蛋白保护剂1.0-10.0重量份。

3.权利要求2所述的复合制剂，其特征在于：所述的蛋白保护剂，按重量份计，是脱脂奶粉1.0-6.0或乳糖1.0-3.0中的一种或两种的混合物。

4.权利要求1所述的复合制剂，其特征在于，所述的抗鸡新城疫病毒卵黄抗体是按照以下方法制得的：

(1)按照常规方法制取抗鸡新城疫病毒高免鸡蛋；

(2)抗鸡新城疫病毒卵黄抗体的提纯

(2.1)将步骤(1)得到的抗鸡新城疫病毒的高免鸡蛋进行消毒，打碎鸡蛋并分离出卵黄；

(2.2)在(2.1)步分离出的卵黄中加入卵黄重量11倍的无菌去离子水，并调整pH值至6.00，然后搅拌5分钟，在4℃的条件下静置48小时之后，通过虹吸抽取一次上清；后再将沉淀物用无菌去离子水稀释8倍，并调整pH值至6.0，然后搅拌5分钟，在4℃的条件下静置24小时之后，通过虹吸抽取二次上清；合并两次上清，经吸附过滤除去内毒素，获得除毒上清液备用；

(2.3)将(2.2)步得到的除毒上清液除去上清中的卵黄微粒杂质；再将滤过液除去低分子杂质，并将截留物通过超滤浓缩为稠液，即为抗鸡新城疫病毒卵黄抗体。

5.权利要求1所述的复合制剂，其特征在于，所述的多糖是按照以下方法提取得到的：

a.将所述的中药原料切碎、洗净后，用冷水浸泡2小时至药心充分浸透，再加入原料重量12倍的水，加热至沸腾后在90℃的情况下，通过热回流浓缩工艺煎煮180分钟同时浓缩得到浓缩药液；

b.将步骤a制备的浓缩药液通过10000转/分离心20分钟，弃去沉淀物，获得上清液并经负压浓缩，使其形成干物质为25％的浓缩药液；

c.将步骤b得到的浓缩药液加4-8倍体积量95％的乙醇，静置过夜，弃去乙醇上清液，沉淀物除去乙醇，然后加水溶解并通过100KD滤膜过滤，除去杂蛋白、内毒素大分子杂质，收集滤过液再通过1KD纳滤膜过滤，除去有机小分子和无机分子及离子杂质，被截留的物质稀释后逆向水流透析24小时；取出浓缩液，加5倍体积量99％乙醇沉淀，搅拌，静置过夜，3000-5000转/分离心20分钟；沉淀物除去乙醇并经过喷雾干燥，即得到本发明所使用的中药多糖。

6.权利要求1所述的复合制剂的制备方法，包括以下步骤：

1)按照常规方法制取抗鸡新城疫病病毒高免鸡蛋；

2)将步骤1)得到的抗鸡新城疫病病毒的高免鸡蛋进行消毒，打碎鸡蛋并分离出卵黄，然后在其中加入卵黄重量11倍的无菌去离子水，并调整pH值至6.00，然后搅拌5分钟，在4℃的条件下静置48小时之后，通过虹吸抽取一次上清；后再将沉淀物用无菌去离子水稀释8倍，并调整pH值至6.0，然后搅拌5分钟，在4℃的条件下静置24小时之后，通过虹吸抽取二次上清；合并两次上清，经吸附过滤除去内毒素，获得除毒上清液，过滤除去上清中的卵黄微粒杂质，再将滤过液除去低分子杂质，并将截留物通过超滤浓缩为稠液，获得抗鸡新城疫病病毒卵黄抗体；

3)将步骤2)制得的抗鸡新城疫病毒卵黄抗体、提取自所述中药的中药多糖按照所述的重量份比例混合溶于无菌去离子水中，使每毫升溶液中鸡新城疫的卵黄抗体血凝抑制效价≥1∶2048；

4)将步骤3)得到的溶液分装于西林瓶进行常规冷冻干燥，并通过Co⁶⁰照射杀灭微生物，即得到本发明所述的鸡新城疫浓缩冻干卵黄抗体复合制剂。

7.权利要求6所述的制备方法，其特征在于：步骤2)所述的pH值的调整使用0.1N HCl或0.1N NaOH完成。

8.权利要求6所述的制备方法，其特征在于：步骤2)所述的吸附过滤使用活性炭完成。