[发明专利]一种利用球孢白僵菌几丁酶基因提高植物抗病性的方法

权利要求书

1.一种利用球孢白僵菌几丁酶基因提高植物抗病性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)获得球孢白僵菌几丁酶基因Bbchit1：设计引物引入酶切位点后，以球孢白僵菌基因组 DNA为模板进行扩增，扩增产物与pUC-T载体连接后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞， 筛选阳性克隆获得Bbchit1基因，所述Bbchit1基因序列如序列1所示；

2)构建组成型表达几丁酶基因植物表达载体：将Bbchit1基因插入植物表达载体P5，构建 一个新的植物表达载体，命名为p5-35S-Bbchit1，组成型表达启动子为花椰菜花叶病毒 CaMV35S启动子；所述P5、p5-35S-Bbchit1的构建分别如图2、图1所示；

3)利用根癌农杆菌介导法，将所述CaMV35S启动子控制下的球孢白僵菌几丁酶基因 Bbchit1整合入植物基因组，实现Bbchit1基因在植物内的组成型表达，提高植物对真菌病 害的抗病能力；

4)将步骤3)获得的转基因植物进一步进行培养栽培、分子鉴定、人工气候室和温室内的抗 病鉴定，获得抗病性提高的转基因植株；所述植物为番茄或棉花。