[发明专利]一种珊瑚草种苗组织培养的繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种珊瑚草种苗组织培养的繁殖方 法。

背景技术

珊瑚草又名缠百合，为鸭跖草科植物竹叶吉祥草的花，竹叶吉祥草(《植 物名实图考》)攀援状草本，长0.5～1米，单叶互生，狭披针形，长5～10 厘米，宽1.2～1.5厘米，先端长渐尖，基部阔楔形，全缘；叶柄长3～6毫 米，叶鞘抱茎。花紫色，杂性，为顶生的圆锥花序，雄花多数，生于花序的 上部；萼片3，披针状卵形；花瓣线形，与萼等长；雄蕊6，基部有须毛；雌 花少数，生于花序的基部，大于雄花，包藏于佛焰苞状的叶腋内，有不发育 雄蕊3；子房圆柱状，花柱圆柱状，柱头3裂。蒴果纸质，椭圆球形3瓣裂。 种子5～7粒，近多角形，淡棕色，排成2裂。生长于山坡阴湿处。分布云南、 广西和湖南。珊瑚草具有调和气血，止痛，治疗月经不调，神经性头痛以及 便秘，有排毒等功效。以前采用分株进行繁殖的方法，一棵珊瑚草一年只能 繁殖出6～8棵，因其繁殖系数低，远不能满足市场的需要。因此，目前珊瑚 草的繁殖方法大多采用组织培养法，它是一种利用植物细胞的全能性，离体 培养植物组织小块，进行植物无性快繁的工厂化育苗技术，具体工艺是：切 下珊瑚草的幼嫩叶片，先诱导出愈伤组织，再分化出不定芽，再培育成可以 移栽驯化的壮苗。一般情况下此过程需要四个月以上，而且需要较高的生产 成本(包括培养基成本和培养条件耗费)等，所以现有的珊瑚草种苗繁殖技 术仍存在以下缺陷：繁殖速度较慢，成本较高。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种繁殖速度 快、成本低的珊瑚草种苗组织培养的繁殖方法。

本发明所采用的技术方案是：本发明包括以下步骤：

(a)芽的诱导和分化步骤：取珊瑚草的嫩叶作为外植体，将所述外植体 加入培养基进行芽分化培养，所述培养基为加有0.5～1.5mg/L的 6-苄氨基嘌呤(6BA)和0.05～0.15mg/L的2，4-二氯苯氧乙酸(2， 4-D)的MS培养基，培养温度为24～26度，光照强度为1800～ 2000lux，光照时间为每天10～14小时；

(b)无菌苗的增殖培养步骤：取所述分化出的不定芽置于0.3～1mg/L的 6-苄氨基嘌呤(6BA)，糖为3％的MS培养基中增殖培养，分化出增 殖苗，培养温度为24～26度，光照强度为2000～3000lux，光照时 间为每天10～14小时；

(c)无菌苗的驯化移栽步骤：将所述增殖苗置于培养基中进行生根培养， 培养基为0.8～1.5mg/L的3吲哚丁酸，糖3％的MS培养基，培养四 周且在无菌苗长出1.5cm的根后，在栽前4天打开瓶盖使无菌苗逐 步适应外界条件，洗净根部后移栽入泥炭土和珍珠岩的基质内，培 养温度为18～28度，弱光条件。

所述外植体来源于开放带菌环境的活体植物，需经消毒处理再作为外植 体，消毒处理是指所述活体植物先用75％的酒精处理，再在0.1％的升汞溶液 中浸泡后取出，然后用无菌水冲洗。

所述酒精处理时间为8～12秒，所述升汞溶液浸泡时间为8～12分钟， 所述无菌水冲洗4～5次。

本发明的有益效果是：本发明采用加有0.5～1.5mg/L的6-苄氨基嘌呤 (6BA)和0.05～0.15mg/L的2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)的MS培养基， 所以可以有效促进珊瑚草叶片快速分化出不定芽；又由于本发明采用0.3～ 1mg/L的6-苄氨基嘌呤(6BA)，糖为3％的MS培养基中增殖培养，所以不定 芽能旺盛增殖；最后增殖苗置于0.8～1.5mg/L的3吲哚丁酸(3IBA)，糖3％ 的MS培养基中培养，所以增殖苗四周即可快速生根。本发明通过直接诱导出 分化芽，分化芽又直接快速增殖减少了愈伤组织的诱导这一步骤，简化培养 条件或培养方式等工艺，可以降低生产成本，提高商品化生产的效率和利润， 因此本发明珊瑚草种苗组织培养的繁殖方法繁殖速度快，成本低。

具体实施方式

实施例一：