[发明专利]一种水包油型复方疫苗佐剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及疫苗领域，具体涉及一种水包油型复方疫苗佐剂及其制备方法。

背景技术

已知如何通过使用疫苗来给予特定的抗原，从而故意刺激机体免疫反应，该 程序可使机体产生一种免疫应答状态，使机体与抗原接触时可产生更为迅速而 有效的应答。有些抗原只有微弱的免疫原性，它们不能引发充足的免疫应答生 物体获得有效保护。然而，通过与一种称为佐剂的物质的混合使用，可以增加 抗原的免疫原性。佐剂通过直接对免疫系统作用，或者通过修饰抗原的药物动 力学特性来增加对抗原的应答，这样就增加了抗原与免疫系统相互作用的时间。

当前，国内兽用疫苗以油佐剂为主，即以非离子型表面活性剂(Tween-80、 Span-80)作为剂型稳定剂和抗原在高剪切力作用下制备成油包水型乳剂疫苗， 该疫苗黏度大、注射困难，产生免疫保护慢且易对动物胴体品质造成不良影响。 近年来，国外也有成功制备出水包油型疫苗佐剂的案例(US 6733754 B2，US 7371395 B2)，前者以卵磷脂-矿物油为油相，以表面活性剂(Tween、Span) 作为剂型稳定剂制备出水包油型佐剂，后者以矿物油为油相，通过改变表面活 性剂(Tween、Span)的比例制备出水包油型佐剂，但是价格昂贵，很少见到有 国内疫苗厂家应用推广。

维生素E本身是一种很好的抗氧化剂，它可以进入皮肤细胞具有抗自由基 链式反应，缺乏对人类或动物的免疫功能均有影响，适量摄取维生素E对细胞 免疫也有很大帮助。

蜂胶是一种稀有珍贵的蜂产品，一般情况下每群蜂几万只每天只能生产生 0.2克左右。蜂胶具有天然的防腐、抑菌、杀菌、抗病毒作用，且有提高机体免 疫能力，抑制肿瘤细胞，镇痛，降低血糖等功能，所以有着广泛的医疗和保健 作用。因此，我国权威药典《中华本草》列举蜂胶有八大功效：抗病原微生物； 增强免疫功能；调节神经机能；促进组织修复；改善血液循环；保护肝功；清 除自由基；无毒副作用。蜂胶在溶解后超声波破碎，能加速其中有效物质的溶 解。

目前，科技工作者已经基本搞清了蜂胶的组成成份，其有效成分是树脂 (55％)、蜂蜡(30％)、精油(10％)与花粉所组成的混合物(5％)。树脂是植物的分泌 物，含有许多具有抗氧化作用的类黄酮素。蜂胶中主要作用的功效成份是黄酮 类化合物，目前已经分离确认的就有30多种。还有阿魏酸等10多种芳香酸， 香豆酸苯乙醋等30多种芳香醋，当归酸等30多种脂肪酸及醋类化合物，赖氨 酸等20多种氨基酸，没药醇等10多种菇烯类化合物，锌等30多种矿物质，维 生素P等多种维生素，胰蛋白酶等多种活性酶。蜂胶里含有其特有的芳香味， 就是来自植物的精油，而这些香精亦具有疗效。

蜂胶佐剂在人用疫苗上研究较多(申请号2005100459649)，通常是先制成 浸膏，再和抗原混合制备成纳米疫苗，但由于其制备过程极其复杂，导致成本 较高。

因此，研制有效的可用于动物疫苗，且能够解决上述问题的佐剂是非常有 意义的。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种水包油型复方疫苗佐剂， 该佐剂可以降低灭活疫苗的黏度，使疫苗注射更简单，可使注射动物快速产生 免疫保护作用。

本发明另一目的在于提供上述水包油型复方疫苗佐剂的制备方法，该方法操 作简单，成本低廉。

本发明上述目的是通过以下方案予以实现的：

本发明水包油型复方疫苗佐剂包括油相部分和水相部分，其中油相部分包含 维生素E、卵磷脂、蜂胶、矿物油和表面活性剂；水相部分为水性载体；其中， 水性载体包括磷酸缓冲液和亲水性表面活性剂。

其中，所述油相部分中各组分在水包油型复方疫苗佐剂总体积中，按体积百 分数计分别为：0.5～2％维生素E、1～6％卵磷脂、2～8％蜂胶、15～30％矿物油、 9～15％表面活性剂；水相部分的体积为余量。所述水相部分的体积为油相部分体 积的1～2倍。

所述维生素E优选注射用α生育酚。

所述卵磷脂优选磷脂酰胆碱含量≥90％的注射用大豆或蛋黄卵磷脂。

所述矿物油为医用白油。

所述水性载体为磷酸缓冲液和亲水性表面活性剂，磷酸缓冲液优选pH＝7.2 的等渗磷酸缓冲盐水。