[发明专利]水蛭素的生理盐水-聚乙二醇双水相提取法

权利要求书

1.一种水蛭素的生理盐水-聚乙二醇双水相提取法，其特征是包括原材料处理、水蛭素粗品提取及水蛭素粗品纯化步骤，将原材料处理后，加入生理盐水搅拌，离心得水相和沉淀；取水相备用，沉淀用组织捣碎机捣成浆状，加生理盐水搅拌，离心得水相和沉淀；取水相备用，沉淀再用组织捣碎机捣成浆状后，用生理盐水重复处理一次；离心，去沉淀取水相；合并3次的水相，得水蛭素粗品提取液；水蛭素粗品提取液加入硫酸钠使浓度为0.04～0.06mol·L^-1，加入聚乙二醇6000使质量浓度为28～30％，搅拌，离心分离，取上相水溶液，加入无水乙醇搅拌均匀，冷藏过夜，离心取沉淀称重后溶解于生理盐水中；加入无水乙醇搅拌均匀，冷藏过夜，离心取沉淀，冷冻干燥得到水蛭素。

2.据权利要求1所述的水蛭素的生理盐水-聚乙二醇双水相提取法，其特征是所述的原材料处理是将菲牛蛭水解血边搅拌边加热至全部凝固后取出，迅速冷却至室温，于组织捣碎机中以10000～12000r/min处理1.5～2分钟捣成浆状。

3.据权利要求1所述的水蛭素的生理盐水-聚乙二醇双水相提取法，其特征是所述的水蛭素粗品提取是将预处理过的浆状原材料加入2～2.5倍重量的生理盐水搅拌2.5～3小时，离心取水相，沉淀用组织捣碎机10000～12000r/min处理1.5～2分钟捣成浆状，按浆状原材料的量加入1.5～2倍生理盐水，240～300r/min搅拌2～2.5小时，离心取水相，沉淀再用组织捣碎机10000～12000r/min处理1.5～2分钟捣成浆状，按浆状原材料的量加入1～1.5倍生理盐水搅拌2～2.5小时，离心去沉淀，取水相，合并3次的水相，此即为水蛭素粗品水溶液。

4.据权利要求1所述的水蛭素的生理盐水-聚乙二醇双水相提取法，其特征是所述的水蛭素纯化是在水蛭素粗品水溶液中加入硫酸钠使浓度为0.04～0.06mol·L^-1，加入聚乙二醇6000使质量浓度为28～30％，240～300r/min搅拌30分钟，离心分离形成上、下相，取上相水溶液，加入2.8～3倍无水乙醇搅拌均匀，冷藏过夜，离心，取沉淀，冷冻干燥得到水蛭素。

5.权利要求4所述的水蛭素的生理盐水-聚乙二醇双水相提取法，其特征是关键试剂优选的使用浓度为：硫酸钠0.05mol·L^-1、聚乙二醇6000质量浓度为29％。