[发明专利]微波条件下制备S-苄基半胱氨酰甘氨酸乙酯的方法

说明书

技术领域

本发明属谷胱甘肽药物中间体合成领域，特别是涉及一种微波条件下制备S-苄基半胱氨酰甘氨酸乙酯的方法。 

背景技术

谷胱甘肽是哺乳动物细胞内最主要的非蛋白巯基和含量最丰富的低分子量多肽，是保护酶和其他蛋白质的硫氢基的一种抗氧化剂，参与细胞内的许多功能活动。还原性谷胱甘肽能抑制肿瘤的生长，诱导分化。Boehringer Mannhein公司正把谷胱甘肽开发成癌症治疗的新药，其制备研究是目前的一个热点。谷胱甘肽的生产方法主要有生物发酵法、酶转移法和化学合成法。微生物发酵法菌株含量较低，提取困难，产率不稳定。酶转移法需要大量的ATP和载体，其成本较高。 

S-苄基半胱氨酰甘氨酸乙酯是化学合成谷胱甘肽的重要中间体，化学法合成谷胱甘肽具有成本低、条件温和、设备简单、可工业化等优点。因此探索优化S-苄基半胱氨酸合成方法和合成条件，有着积极的意义。 

已有的S-苄基半胱氨酰甘氨酸乙酯的合成中常用的氨基保护基有： 

1.苄氧羰基(-Nbz) 

首先用氯化苄保护巯基，然后用氯甲酸苄脂做保护剂保护氨基，然后与甘氨酸乙酯合成二肽，然后脱氨基保护得到S-苄基半胱氨酰甘氨酸乙酯。脱保护的试剂一般选用Pa/C催化剂和溴化氢的醋酸溶液。但是通过实验发现，用苄氧羰基做保护基对于本实验来讲，由于S-苄基-L-半胱氨酸含有硫原子，会使Pa/C催化剂失活，无法得到所要的目标产物。溴化氢的醋酸溶液在保存过程中由于溴化氢的挥发浓度很容易发生变化，原料特别不易保存。另外在溴化氢醋酸这种酸性溶液中，脱保护时很容易发生酸性水解而得到副产物。 

2.芴氧羰基(Fomc) 

先用氯化苄保护巯基，然后用含有Fomc的基团保护氨基，与甘氨酸乙酯合成二肽，然后脱氨基保护得到S-苄基半胱氨酰甘氨酸乙酯。(文献：邱芊，陈永森，朱颐申，韦萍，固相多肽合成中氨基酸保护的研究进展，化学时刊，2005.19.(6))芴氧羰基(Fomc)是在弱碱条件下解离的基团，对碱敏感，亲水性不是很好，并且反应过程是可逆的。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种微波条件下制备S-苄基半胱氨酰甘氨酸乙酯的方法，该方法简单，反应时间短，产率高，适合于工业化生产。 

本发明的合成路线如下： 

本发明的一种微波条件下制备S-苄基半胱氨酰甘氨酸乙酯的方法，包括：(1)S-苄基-N-苄氧羰基半胱氨酰甘氨酸乙酯的合成 

甘氨酸乙酯盐酸盐(购于阿拉丁试剂公司)溶解于二氯甲烷中，并向该溶液中加入20ml四氢呋喃和7ml三乙胺，搅拌形成均一溶液，然后加入S-苄基-N-苄氧羰基半胱氨酸形成均一透明的溶液，控制其温度在-2℃-0℃，另取N，N`-二环己基碳二亚胺(DCC)溶解在二氯甲烷中，在搅拌条件下，慢慢滴加到上述混合溶液中，1-2h滴加完毕后，保持在-2℃-0℃反应5h，过滤除去N，N`-二环己基脲(DCU)，滤液分别用稀HCl、NaHCO₃洗涤，用无水NaSO₄干燥，减压浓缩，石油醚固化； 

(2)S-苄基半胱氨酰甘氨酸乙酯的合成 

在装有回流冷凝管(冷凝管上面接一汽球来防止溴化氢挥发过快)三口烧瓶中加入步骤(1)所得S-苄基-N-苄氧羰基半胱氨酰甘氨酸乙酯，置于微波仪(内置磁力搅拌)中，然后加入饱和的溴化氢的醋酸溶液，反应物很快溶解并放出气体，反应20min，减压抽去溴化氢和冰醋酸，得橙色透明液体，加入乙醚洗涤除去残余的溴化苄，水层加水后过滤除去不溶物，滤液冷冻干燥，即得略带橙色的晶体。 

所述步骤(2)S-苄基-N-苄氧羰基半胱氨酰甘氨酸乙酯与饱和的溴化氢醋酸 溶液得摩尔比为1∶6。 

所述步骤(2)微波仪的温度为20℃-30℃。 

所述步骤(2)微波仪的温度为30℃，微波辐射时间为20min。 

上述结果表明微波技术可用于肽类化合物的α-氨基脱保护。 

有益效果 

本发明的制备方法简单，反应时间短，产率高，适合于工业化生产。 

附图说明

图1S-苄基半胱氨酰甘氨酸乙酯的¹H NMR图。 

具体实施方式