[发明专利]一种利用内酯酶制备光学纯2-羟基-4-苯基丁酸的方法

权利要求书

1.一种利用内酯酶制备光学纯2-羟基-4-苯基丁酸的方法，其特征是包括如下步骤：

1)采用Fusarium proliferatum内酯水解酶水解4-苯基-2-羟基-4-丁内酯

(1)将表达来自保藏号为CGMCC1494的Fusarium proliferatum内酯水解酶基因 的重组大肠杆菌JM109(DE3)或BL21(DE3)，在发酵培养基中进行扩增培养，离心洗 涤得到静息细胞；

(2)将(1)收获的静息细胞悬浮于pH为6.0～7.0的磷酸钾缓冲液中，加入4-苯基-2- 羟基-4-丁内酯，在25～40℃反应0.5～8h，然后采用常规的分离方法从反应混合物中收集 光学纯的(2S)-4-苯基-2-羟基-4-丁内酯、(2R)-4-苯基-2，4-二羟基丁酸和(2R)-4-苯基-2-羟基 -4-丁内酯；

2)将步骤1)所获得的光学纯的(2S)-4-苯基-2-羟基-4-丁内酯、光学纯的(2R)-4-苯基 -2-羟基-4-丁内酯或光学纯的(2R)-4-苯基-2，4-二羟基丁酸用冰醋酸溶解，在常温常压和 Pd/C催化的条件下氢化12h，得到(S)2-羟基-4-苯基丁酸、(R)-2-羟基-4-苯基丁酸或(R)-2- 羟基-4-苯基丁酸；所述的光学纯的(2S)-4-苯基-2-羟基-4-丁内酯、光学纯的(2R)-4-苯基-2- 羟基-4-丁内酯或光学纯的(2R)-4-苯基-2，4-二羟基丁酸与Pd/C的重量比为1∶0.01～0.05。

2.如权利要求1所述的方法，其特征是所述的步骤2)所获得的化合物在有机溶剂中 重结晶获得精制品。

3.如权利要求1所述的方法，其特征是步骤1)中所述的内酯水解酶催化水解的底 物4-苯基-2-羟基-4-丁内酯为四种非对映异构体混合物，其浓度为10～200mmol/L。

4.如权利要求1所述的方法，其特征是步骤1)中所述的发酵培养基组成如下：葡 萄糖1～50g，蛋白胨1～20g，KH₂PO₄ 1～10g，K₂HPO₄ 1～10g，NaCl 0.1～2g，MgSO₄ 0.1～2 g，自来水1000ml，pH3～8。