[发明专利]附红细胞体裸鼠感染模型的构建方法

权利要求书

1.一种附红细胞体的裸鼠感染模型的构建方法，其特征在于步骤如下：

①从感染附红细胞体病的血中分离纯化出附红细胞体，从附红细胞体病血中分离出来的附红细胞体重悬于无菌的生理盐水中，此悬液为分离纯化的附红细胞体悬液；

②裸鼠的饲养，饲养于熏蒸消毒的隔离室内；

③对裸鼠静脉接种，对裸鼠接种纯化的附红细胞体悬液，具体为：对7周龄SPF裸鼠尾静脉注射100ul纯化的附红细胞体悬液；

④动物模型的检测，验证附红细胞体裸鼠感染模型显示出附红细胞体感染红细胞的结构。

2.如权利要求1所述的附红细胞体的裸鼠感染模型的构建方法，其特征在于所述的附红细胞体悬液中附红细胞体数目大于等于10⁷个。

3.如权利要求1所述的附红细胞体的裸鼠感染模型的构建方法，其特征在于所述的感染是以分离纯化的附红细胞体作为感染源。

4.如权利要求1所述的附红细胞体的裸鼠感染模型的构建方法，其特征在于所述的接种是指：静脉注射。

5.如权利要求1所述的附红细胞体的裸鼠感染模型的构建方法，其特征在于所述的检测包括鲜血压片镜检、PCR检测和透射电镜镜检三步法的综合检测。

6.如权利要求1或5所述的附红细胞体的裸鼠感染模型的构建方法，其特征在于所述的鲜血压片检测是指感染3天后，分别将感染组和对照组裸鼠进行尾静脉采血，将采集的血液压片，观察。

7.如权利要求1或5所述的附红细胞体的裸鼠感染模型的构建方法，其特征在于所述的PCR检测，其的引物是根据根据附红细胞体16S rRNA序列设计特异性引物，上游为5′-CACGCCGTAACGATGGGTAT-3′，下游为：5′-CAGCCCAAGGCATAAGGGG-3′.

8.如权利要求1或5所述的附红细胞体的裸鼠感染模型的构建方法，其特征在于所述的透射电镜检测，是指将实验组裸鼠尾静脉血用2.5％的戊二醛固定2h，用0.1mol/L磷酸漂洗液漂洗三次，1％锇酸固定液固定2-3h，再用0.1mol/L磷酸漂洗液漂洗三次，梯度脱水，逐级浸透，包埋，切片，观察。