[发明专利]荧光素酶活性片段及其应用

权利要求书

1.一种荧光素酶活性片段，其特征在于，所述活性片段的序列是Gaussia荧光素酶缺失N端37个氨基酸残基所形成的序列，并且所述活性片段具有与野生型Gaussia荧光素酶一致的荧光素酶活性。

2.如权利要求1所述的荧光素酶活性片段，其特征在于，所述活性片段适于在原核或真核细胞内表达。

3.如权利要求1所述的荧光素酶活性片段，其特征在于，所述活性片段具有SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。

4.权利要求1-3中任一项所述的荧光素酶活性片段的编码序列。

5.如权利要求4所述的编码序列，其特征在于，所述编码序列选自：

(i)如SEQ ID NO：1所示的序列；和

(ii)在严格条件下能与SEQ ID NO：1的序列杂交的分子。

6.如权利要求4所述的编码序列，其特征在于，所述编码序列经密码子偏爱优化。

7.权利要求1-3中任一项所述的荧光素酶活性片段或权利要求4-6任一项所述的编码序列在作为报告因子、荧光能量供体中的用途。

8.权利要求1-3中任一项所述的荧光素酶活性片段或权利要求4-6任一项所述的编码序列在细胞或活体成像、药物的高通量筛选、微生物检测或蛋白质拓朴结构鉴定中的用途。

9.一种试剂盒，其包含：权利要求1-3中任一项所述的荧光素酶活性片段或权利要求4-6任一项所述的编码序列。

10.一种鉴定蛋白质拓朴结构的方法，所述方法包括：

将荧光素酶活性片段插入待确定其拓朴结构的蛋白质的不同位点，从而获得融合蛋白；以及

检测融合蛋白所产生的荧光强度；

若荧光强度低，则表明融合位点位于细胞质中；

若荧光强度高，则表明融合位点位于周质空间中。