[发明专利]一种检测真姬菇菌种质量变化的方法

权利要求书

1.一种检测真姬菇菌种质量变化的方法，其特征在于：所述的检测方法包括下列步骤：

a.菌种菌丝体的培养；

b.检测菌种质量液体培养基的配置；

c.液体培养标准菌种，并记录标准参数；

d.液体培养待评价菌种；

e.观察培养液变化；测定培养液在615nm处的吸光度，根据公式D＝1-A615(菌种培养液)/A615(空白培养液)，来计算D值；

f.将培养液颜色、D值和所建立标准菌种的参数进行比较，检测菌种质量变化趋势。

2.如权利要求1所述的一种检测真姬菇菌种质量变化的方法，其特征在于：步骤a中，菌种菌丝体可以是保藏菌种，母种，生产用各级种，组织分离获得的菌种，必须为活体，且可形成子实体的真姬菇菌种纯培养物。

3.如权利要求1所述的一种检测真姬菇菌种质量变化的方法，其特征在于：步骤b中，检测菌种质量的液体培养基各成分的重量百分比为：乳糖3-6％、蛋白胨7-9％、酵母粉4-5％、溴百里酚蓝0.02-0.03％，余量为蒸馏水，pH7.0，上述各成分的重量百分比之和为100％。

4.如权利要求1所述的一种检测真姬菇菌种质量变化的方法，其特征在于：步骤c中，标准菌种的选择为所要评价菌种的保藏菌种，将培养于马铃薯葡萄糖琼脂平板的保藏菌种和不同批次菌种的菌块1cm²，接种于装有50mL液体检测培养基的150mL三角瓶中，若进行静置培养务必使接种的菌块浮于液面，因为该培养过程是需氧的，如沉入液内，会影响检测结果；若摇床培养没有上述要求，接种后，置于25℃环境培养，摇床150rpm振荡培养5天，或静置培养10天。

5.如权利要求1所述的一种检测真姬菇菌种质量变化的方法，其特征在于：步骤d中，接种1cm²的菌丝体到100mL液体培养基中，液体培养于23～26℃，静置或震荡均可，150rpm振荡培养4～5天或静置培养10～14天，观察液体培养基颜色变化，当静置培养时，接种务必使菌块浮于液体表面，以保证培养在较短时间完成。

6.如权利要求1所述的一种检测真姬菇菌种质量变化的方法，其特征在于：步骤e中，观察液体培养基颜色的变化：黄色→绿色→蓝色，为菌种质量由好到差。

7.如权利要求1所述的一种检测真姬菇菌种质量变化的方法，其特征在于：步骤e中，使用分光光度计测定培养液在615nm处的吸光度，通过D＝1-A615(菌种培养液)/A615(空白培养液)公式可得到各菌种的D值，D值越大质量越好，反之，质量越差。

8.如权利要求1所述的一种检测真姬菇菌种质量变化的方法，其特征在于：步骤f中，比较保藏菌种与栽培菌种之间的颜色差异：a、若栽培菌种液体培养基颜色较保藏菌种差异不明显，则可以使用；b、若栽培菌种液体培养基颜色较保藏菌种明显变蓝的趋势，则说明该批次菌种质量不好，产量将下降，畸形菇数量上升，需谨慎使用，或弃用；c、记录了每次检测保藏菌种的颜色，如发现保藏菌种较此前颜色变蓝且幅度较大，则需要对保藏菌种进行提纯复壮，或者更换菌种；比较保藏菌种与栽培菌种之间D值变化，当D值变低小于等于30％时，则可以使用；当D值变低大于30％时，则说明该批次菌种质量不好，产量将下降，畸形菇数量上升，需谨慎使用，或弃用；当批次间保藏种D值变低大于30％时，则需要对保藏菌种进行提纯复壮，或者更换菌种。

9.如权利要求1所述的一种检测真姬菇菌种质量变化的方法，其特征在于：步骤f中，所谓菌种质量变化趋势的检测，即预测该菌种用于栽培时，产量、畸形菇数量相对原菌种的变化情况。