[发明专利]一种检测真姬菇菌种质量变化的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及现代农业技术的菌种质量评价技术领域，具体的说是一种简单评价栽培真姬菇菌种质量变化的方法。 

背景技术：

食用菌产业的发展，需要大量的菌种。菌种作为重要的生产资料，对产业的发展起着重要的作用，从某种意义上甚至可以说是决定了栽培的成败。但是，由于多年形成的分散生产经营方式，菌种生产缺乏规范，菌种生产和质量常出现这样、那样的问题，随着产业的发展，问题日益突出，甚至成为主产区的社会不安定因素。产业的发展迫切需要对菌种进行科学有效的管理。为了保护和合理利用食用菌种质资源，规范品种选育及生产、经营、使用和管理，根据《中华人民共和国种子法》(以下简称《种子法》)和《中华人民共和国植物新品种保护条例》，农业部制定了《食用菌菌种管理办法》(以下简称《管理办法》)。在《管理办法》第四章菌种质量禁止生产经营假、劣菌种。但实际生产中，优质菌种经长期无性世代繁殖，不知不觉中已经发生了退化。突然有一天，这些“退化”一下子表现出来。不同食用菌退化的表现各异，而这些现象，在营养菌丝阶段从形态外观上通常是无法区分的。 

真姬菇[Hypsizygus marmoreus(Peck)Bigelow]，又名蟹味菇、海鲜菇、鸿喜菇、玉蕈、胶玉蘑，隶属于担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、白蘑科、离褶菌族、玉蕈属，是一种质地脆嫩，味道鲜美，营养丰富，具有多种保健功效的珍稀食用菌，深受广大消费者的喜爱。真姬菇是已经实现工厂化生产的主要食用菌之一，产量仅次于金针菇、杏鲍菇。真姬菇是栽培期较长的食用菌，大约需要90～110d。这主要由于真姬菇菌丝培养必须经一个生理成熟期(后熟期)，才能长出较好的菇。如果到出菇时才发现是劣质菌种，对于一个日产5吨的中等规模食用菌工厂，已经生产了3000000瓶。如上所述，通过栽培试验检测菌种质量的方法，虽然可靠，但对食用菌工厂时间就是效益，闲置厂房设备也是损失。对于菇农来说劣质菌种则是一季减产甚至是绝收。 

目前，检测菌种质量，栽培试验是最具说服力的方法。该方法主要可以考察菌种是否均一且性状稳定，对生长周期短的食用菌可能还可行。菌种在培养基质上生长和出菇的过程中，一方面可从形态特征、 生理生态特性方面考察菌种质量，另一方面可以从畸菇率、原基发生期、原基发生数量、菇体色泽、产量等方面考察菌种质量。退化品种的菌种经栽培后，常表现出菇期不一致、菇潮不明显、产量下降、对不良环境或杂菌的抗性降低等现象，而老化菌种则表现为出菇提前、菇体变薄等现象。而该检测菌种质量方法的缺点就是周期长，尤其对生长周期长的菌种，使用该方法有待商榷。 

新近发展起来的DNA指纹分析技术，如RAPD、RFLP等，可以从基因组水平进行菌种鉴别。该方法可以检测病菌侵染、杂菌污染、菌株混杂等问题，暂且不论该方法是否能解决菌种质量其他问题(如退化菌株)，但就其操作的复杂性，对缺乏生物技术知识的菇农来说也是很难接受的。其他还有一些检测菌种质量的方法，如形态特征观察、生理特征、生化测定等，这些方法一般都需要长期的栽培经验和一定的生物学基础。根据目前研究，上述方法与菌株质量并不存在必然联系。因此，无论是食用菌工厂还是广大菇农都亟需一种快速、简便的评价菌种质量的方法。 

发明内容：

本发明的目的在于提供一种改进的检测评价真姬菇菌种质量变化的方法，它可克服现有技术中检测方法操作复杂、需要长期的栽培经验和一定的生物学基础，无法满足食用菌工厂和广大菇农需要的一些不足。 

为了实现上述目的，本发明的技术方案是：一种检测真姬菇菌种质量变化的方法，其特征在于：所述的评价方法包括下列步骤： 

a.菌种菌丝体的培养； 

b.检测菌种质量液体培养基的配置； 

c.液体培养标准菌种，并记录标准参数； 

d.液体培养待评价菌种； 

e.观察培养液变化；测定培养液在615nm处的吸光度，根据公式D＝1-A615(菌种培养液)/A615(空白培养液)，来计算D值； 

f.将培养液颜色、D值和所建立标准菌种的参数进行比较，检测菌种质量变化趋势。 

上述菌丝体在用于食用菌生产时，为保藏菌种菌丝体和用于栽培的各级菌种；在用于育种筛选菌株时，为出发菌株和各个衍生菌株。 

上述接种量可根据培养基的多少放大或缩小，适当正增加接种量可以加速检测时间，但需要摸索培养基变色的完成时间即培养天数。