[发明专利]沙眼衣原体感染定量检测荧光PCR试剂盒无效
申请号: | 200910200396.3 | 申请日: | 2009-12-11 |
公开(公告)号: | CN102094076A | 公开(公告)日: | 2011-06-15 |
发明(设计)人: | 穆海东;汪宁梅;穆宇豪;黎飒 | 申请(专利权)人: | 上海裕隆临床检验中心有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/06;G01N21/64 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 200233 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 沙眼 衣原体 感染 定量 检测 荧光 pcr 试剂盒 | ||
1.一种沙眼衣原体感染定量检测荧光PCR试剂盒,其特征在于,包括阳性工作标准品、阴性参考品、阳性参考品、UNG酶、Taq聚合酶、荧光PCR反应液,以及DNA提取液;所述的荧光PCR反应液包括PCR扩增引物、特异性荧光探针。
2.如权利要求1所述的荧光PCR试剂盒,其特征在于,所述的阳性参考品和阳性工作标准品为含有插入沙眼衣原体特异序列的PMD18-T载体质粒,所述插入的特异序列如下:
CTGTTTGCAAACTGTTCATCGCATCTGTTTTTACTATTTCCCTGGTTTTAAAAAATGTTCG
ACTATTTTCTTGTTTAGAAGGTTGCGCTATAGCGACTATTCCTTGAGTCATCCTGTTTAGG
AATCTTGTTAAGGAAATATAGCTTGCTGCTCGAACTTGTTTAGTACCTTCGGT 175bp。
3.如权利要求1或2所述的荧光PCR试剂盒,其特征在于:所述的阳性参考品为存放浓度为1.0×106-1.0×107拷贝/毫升的重组质粒。
4.如权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于:所述的阳性工作标准品为存放浓度分别为5.0×104、5.0×105、5.0×106、5.0×107拷贝/毫升的重组质粒。
5.如权利要求1所述的荧光PCR试剂盒,其特征在于:所述的阴性参考品为CT阴性血清。
6.如权利要求1所述的荧光PCR试剂盒,其特征在于,所述的PCR扩增引物序列如下:
扩增检测沙眼衣原体的正向引物GCATCTGTTTTTACTATTTCCCTGG 25bp;
扩增检测沙眼衣原体的反向引物GAGCAGCAAGCTATATTTCCTTAACA 26bp。
7.如权利要求1所述的荧光PCR试剂盒,其特征在于,所述的特异性荧光探针序列如下:
检测沙眼衣原体的探针GCGACTATTCCTTGAGTCAT 20bp。
8.如权利要求1或7所述的荧光PCR试剂盒,其特征在于,所述的特异性荧光探针为Taqman探针,标记探针5’端的为一种荧光报告基团,可以是FAM、TET、JOE、VIC、HEX、ROX、TAMRA、CY3、CY5;3’端的为一种荧光淬灭基团,可以是TAMRA、DABCYL、BHQ0、BHQ1、BHQ2。
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