[发明专利]一种流产鹦鹉热衣原体疫苗及制备方法无效
申请号: | 200910203024.6 | 申请日: | 2009-05-13 |
公开(公告)号: | CN101579521A | 公开(公告)日: | 2009-11-18 |
发明(设计)人: | 邱昌庆;宋竹青;周继章;曹小安;郑福英;蔺国珍;宫晓炜 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | A61K39/118 | 分类号: | A61K39/118;A61P31/00;A61P15/06;G01N33/53;C12N15/70;C12P21/02;C12R1/19 |
代理公司: | 兰州振华专利代理有限责任公司 | 代理人: | 张 晋 |
地址: | 730046甘*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 流产 鹦鹉 衣原体 疫苗 制备 方法 | ||
1、一种由流产鹦鹉热衣原体外膜蛋白A构成的亚单位疫苗。
2、权利要求1所述亚单位疫苗中的流产鹦鹉热衣原体外膜蛋白A的制备方法,其特征是以从流产鹦鹉热衣原体提取细菌的总DNA为模板,设计两对特异性引物进行套式聚合酶链反应,扩增得到流产鹦鹉热衣原体外膜蛋白A的完整基因(ompA),将该基因克隆到原核表达载体中,获得重组表达载体;用重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞,提取重组质粒,经PCR和酶切鉴定,筛选出阳性克隆;将此重组质粒转化至大肠杆菌中,进行诱导表达得到疫苗用抗原蛋白。
3、根据权利要求2所述的亚单位疫苗中的流产鹦鹉热衣原体外膜蛋白A的制备方法,其特征是所用的两对引物分别是:
第一对引物的上游引物为P15’-GAG GTG AGT ATG AAAAAA CTC TTG-3’,
第一对引物的下游引物为P25’-CAA GGT TGT AAT CTC TAG GTT TCA-3’;
第二对引物的上游引物为P5:5’-ACG GAA TTC TTG CCT GTA GGG AAC C-3’(含EcoRI酶切位点)
第二对引物的下游引物为P6:5’-TGA GTC GAC GAA TCT GAA TTG AGC ATT CAT-3’(含Sal I酶切位点)。
4、权利要求2或3所述的亚单位疫苗中的流产鹦鹉热衣原体外膜蛋白A的制备方法制备的流产嗜性衣原体外膜蛋白A用于制备牛流产嗜性衣原体的检测试剂。
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