[发明专利]检测李斯特氏菌溶血素的免疫胶体金试纸及其制备方法

权利要求书

1.一种测定样品中李斯特氏菌溶血素的免疫胶体金试纸，包括样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜、吸水纸及PVC底板，其特征在于：

1)胶体金垫是由在玻璃纤维膜上包被李斯特氏菌溶血素的金标单克隆抗体所构成，在硝酸纤维膜上检测区包被抗李斯特氏菌溶血素的多克隆抗体；

2)在硝酸纤维膜上的质控区包被抗鼠IgG的多克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的李斯特氏菌溶血素的金标单克隆抗体，其特征在于：应用大肠杆菌表达重组李斯特氏菌溶血素作为免疫原，免疫BALB/c小鼠。取免疫后小鼠的脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞sp/20进行细胞融合，经过三次亚克隆筛选后，经western blotting、免疫荧光鉴定获得分泌针对单核细胞增生李斯特氏菌溶血素单克隆抗体的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞所分泌单克隆抗体特异性高、稳定性好。

3.根据权利要求1所述的抗李斯特氏菌溶血素的多克隆抗体，其特征在于：将纯化的重组李斯特氏菌溶血素蛋白，免疫家兔后制备。

4.根据权利要求1所述的李斯特氏菌溶血素的免疫胶体金试纸，其特征在于可以用于方便、快捷、准确地检测李斯特氏菌溶血素，也可用于检测动物及其组织、青贮饲料、食品、肉制品、粪便等样品中是否污染了产溶血素的李斯特氏菌。