[发明专利]草菇液体菌种的深层发酵培养方法及其培养基

说明书

技术领域：

本发明涉及菌种深层发酵培养方法及其培养基，特别是草菇液体菌种的深层发酵培养方法及其培养基。

背景技术：

草菇一直使用固体菌种进行生产。在草菇工厂化周年生产中，由于草菇生产周期极短，所以菌种需求量很大，因此固体菌种完全不能适应草菇工厂化周年生产的需要。目前使用的草菇液体菌种发酵培养技术还存在很多问题，具体为：(1)使用通用型培养基进行母种繁殖，因此母种繁殖时间较长，菌丝质量不高；(2)多是将用母种培养基培养的固体菌种不经过均质化处理，直接进行一级摇瓶培养，这样生产菌球的时间长、菌球大小不一，不利于菌球的生长，影响草菇液体菌种的质量。(3)液体菌种所用的培养基含有大量的葡萄糖、蔗糖等成份，使培养环境与栽培环境产生很大的反差，生产的液体菌种在栽培接种后往往产生不吃料的现象，严重影响成品生产。

发明内容：

本发明克服现有草菇液体菌种发酵培养方法的不足，设计一种既能培养出大小均匀适中的菌种又能缩短培养时间的草菇液体菌种深层发酵培养方法，具体包括：

提供一种在草菇液体菌种培养过程中用于母种繁殖的专用母种培养基，该母种培养基能促使菌丝生长旺盛、生长时间短、菌丝强壮，菌丝质量高。

提供一种在草菇液体菌种培养过程中使用的以稻草粉和棉籽壳粉为主的草菇原种专用培养基，该培养基既能提供生长旺盛、发育均匀的菌丝片段；又能易于在一级摇瓶培养中进行菌种的均质化处理后形成均匀的浆质菌种。该培养基同时能将原种长期安全的保藏。

提供一种在草菇液体菌种培养过程中使用的培养扩增培养基。

提供一种在草菇液体菌种发酵培养过程中使用的深层发酵培养基，该培养基能降低成本，利于产生高质量液体草菇菌种。

本发明的技术方案为：

(1)在草菇专用母种培养基内进行母种培养。

(2)将在母种培养基内培养长满试管的母种菌丝移种到草菇原种专用培养基内进行过渡培养，培养条件为：温度30±1℃，黑暗培养，待菌丝长满。

(3)将专用原种充分打碎后立即移种到摇瓶液体培养基中进行均质化处理后形成均匀的浆质菌种。

(4)在摇瓶液体培养基中进行一级摇瓶的培养扩增。

(5)将一级摇瓶内生长2-4天的菌液移入盛有新鲜摇瓶液体培养基的二级摇瓶中进行二级摇瓶培养扩增。

(6)将二级摇瓶出来的菌液移入盛有液体培养基的血清瓶中进行发酵处理即可得到成品草菇液体菌种。

上述草菇专用母种培养基原料部分的成分和重量百分比含量范围为：苹果汁(碾碎榨汁)10％-30％琼脂1％-3％草菇菌糠浸出液70％-90％；用氢氧化钠调节pH至6.4-7.4.母种培养基内的培养条件为：温度30±1℃，黑暗培养，待菌丝长满即可。

上述草菇专用原种培养基原料部分的成分和重量百分比含量范围为：稻草粉30％-50％，棉籽壳粉30％-50％；麸皮或米糠4％-16％，石膏1％-4％，含水量50％-70％。草菇专用原种培养基内的培养条件为：温度30±1℃；待菌丝长到试管底时即可。

上述草菇专用原种的保藏方法是：将试管用塑料袋包好在20℃恒温保藏，这样草菇专用原种可以保藏4个月左右。可以按生产需要随时用于进行一级摇瓶的培养扩增。

上述摇瓶液体培养基为一级和二级摇瓶的培养扩增培养基，其原料部分的成分和重量百   分比含量范围为：黄豆粉1％-4％玉米粉1-4％蔗糖0.5％-2％葡萄糖0.5％-2％酵母膏0.15％-0.6％蛋白胨0.05-0.2％磷酸二氢钾0.05％-0.2％硫酸镁0.025％-0.1％Ph7.8-8。

上述一级和二级摇瓶的培养扩增是在三角瓶内进行的。

上述一级和二级摇瓶内液体菌种培养扩增的培养条件是：温度：32±1℃；震荡频率：125-155转/分钟；接种量：10％-15％；培养时间：一级和二级摇瓶分别为3-4天和2-3天。

上述液体菌种在血清瓶中进行发酵处理的液体培养基为深层发酵培养基，其原料部分的成分和重量百分比含量范围为：豆饼粉1％-5％玉米粉1％-5％蔗糖0.5％-2％葡萄糖0.5％-2％蛋白胨0.15-0.6％豆科类植物油0.25％-0.5％；磷酸二氢钾0.05％-0.2％硫酸镁0.025％-0.1％Ph7.8-8。

上述液体菌种在血清瓶中进行发酵处理的培养条件：温度：32-35±1℃通气量1∶0.5(体积比)；通气压力0.5kg/cm2；培养时间：50小时。

技术效果：