[发明专利]分光光度测量生物样品中BNCT药物里硼含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于核化学分析测试技术领域，具体涉及一种用分光光度法测量生物 样品中BNCT药物里硼含量的方法。

背景技术

硼中子俘获疗法(boron neutron capture therapy，BNCT)是一种新型的放疗 方法，它是将含¹⁰B药物通过口服或注射方法引入体内，并使之选择性地聚集在 癌细胞中，然后用中子照射病变部位，使¹⁰B发生¹⁰B(n，α)⁷Li核反应，利用 由此产生的α粒子和⁷Li离子在细胞范围内杀死癌细胞。该方法取得成功的一个 前提条件是给药后生物体内硼浓度的准确测量。目前，生物样品中硼含量的测定 方法主要有质谱法、原子光谱法、分光光度法、电化学分析法和核反应分析法。 质谱法是硼及其同位素测定中最重要的一种分析方法，尤其是等离子体质谱法(如 ICP-MS)的发展，不仅克服了大部分该方法的缺点，而且实现了生物样品中硼及 其同位素比率的测定，正在发展为当前技术中应用最为广泛的方法。但缺陷是仪 器设备价格昂贵，需专业人员操作及日常维护。原子光谱法如AES和AAS可同 时测定包括硼在内的多种痕量元素，但是对硼、磷等主要以氧化离子形式存在的 元素不够灵敏。电化学分析法使用的电极易受溶液中污染物的影响，稳定性和重 现性差。核反应分析法在实际应用中有局限性。分光光度法所使用的仪器设备简 单，易操作，是一种易于推广的硼元素测量方法。但目前使用比较普遍的姜黄素 法需要无水状态；次甲基兰法试剂空白大，且减小空白难度大；蒽醌法需大量的 浓硫酸，且反应速度很慢。

发明内容

(一)发明目的

本发明针对现有的分光光度法测量生物样品中BNCT药物里硼含量的方法所 存在的不足，提供了一种可准确、简便、快速测定生物样品中BNCT药物里硼含 量的分光光度法。

(二)技术方案

一种分光光度测量生物样品中BNCT药物里硼含量的方法，包括生物样品消 解、标准曲线测定、生物样品测定流程，关键在于：所用显色剂为3-甲氧基-甲亚 氨H，所确定的最大检测波长为390～410nm；最终测量液pH值为4-6.5。

通常，分光光度测量生物样品中BNCT药物里硼含量时，所取的最终测量液 体积为5mL。以此为例，具体测量方法如下。

所述的生物样品消解是取0.1～0.2mL血液样品，或0.1～0.2g其他组织并制 成匀浆的样品，加0.5～1.0mL浓硝酸后放置12～24小时，备用。

所述的标准曲线测定是分别吸取0～1.0mLBPA标准使用液，依次加入EDTA 溶液0.5～0.7mL，乙酸-乙酸胺缓冲液1～1.5mL，显色剂3-甲氧基-甲亚胺H 溶液0.8～1.6mL，加水定容至5.0mL，pH值为4.0～6.5，混匀放置30～120min， 在390～410nm处测吸光度，绘制标准曲线。

所述的生物样品测定流程是取上述准备好的消解液0.1～0.2mL，依次加入 EDTA溶液0.5～0.7mL，乙酸-乙酸胺缓冲液1～1.5mL，显色剂3-甲氧基-甲亚 胺H溶液0.8～1.6mL，加水定容至5.0mL，pH值为4.0～6.5，混匀放置30～ 120min，在390～410nm处测吸光度，根据标准曲线计算硼含量。

(三)实施效果

3-甲氧基-甲亚胺H是一种新型的硼显色剂，它避免了姜黄素等传统硼显色剂 显色时的苛刻条件，使操作变得简单，且反应时间短，专属性强，灵敏度高。同 时，研究发现硼与3-甲氧基-甲亚胺H显色剂在pH为4.0～6.5的溶液中显色稳定， 而pH过低时将导致最大吸收波长向短波长方向移动，且吸光度变小；而显色剂 本身有颜色，且随体积的增大吸光度也增大，因此，在显色稳定的范围内选择尽 量小的体积。因此，本发明所提供的技术方案具有快速，简便，特异，灵敏等优 点，对生物体样品内硼含量测定的准确度和精密度满足要求。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明所提供的技术方案作进一步阐述。

实施例1

本实施例为正常小鼠体内BPA生物分布实验。实验前准备如下实验试剂、实 验仪器，并配置所需溶液、处理生物样品。

1.实验试剂