[发明专利]内源性干扰素诱导物的注射液和纳米微囊化溶液的制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种通过诱导内源性干扰素水平的提高，防治养殖动 物病毒性感染的药物组合；具体涉及该组合用药物的制备及方便各种 应用的制剂制备方法。

背景技术：

病毒性感染是引起养殖动物死亡、影响动物养殖经济效益的重要 因素，随着国家兽药质量标准的规范，取消了大批原地方标准的抗病 毒药物，可选用的抗病毒药物的短缺与兽医临床的需求矛盾日益突 出。

1967年，美国Merck药厂的Field等人发现了酶促合成的双链 核酸(double strained RNA，dsRNA)具有诱生干扰素的能力，其中 聚肌胞(Polyinosinic-polycytidylic Acid，PIC)的诱生能力最 强，它可以刺激机体产生广谱的内源干扰素，进而激活蛋白激酶和 2’，5’-寡聚腺苷酸合成酶、Mx蛋白等抗病毒因子，以降解进入细 胞的病毒，达到抑制、治疗病毒性感染的目的。

PIC由寡聚肌苷酸与寡聚胞苷酸在合适的条件下按碱基配对的原 则聚合而成。研究表明，PIC分子量的大小、双链的紧密程度及其稳 定性是决定其诱导干扰素活性高低的重要影响因素。目前，国内虽然 有寡聚肌苷酸及寡聚胞苷酸原料的生产，但尚缺乏对PIC双链配对的 合适条件、稳定性影响因素等的系统研究。

关于内源性干扰素诱导剂方面的研究和应用，也有过一些报道。 如专利申请号为95111433.6的发明专利“人白细胞干扰素口含片及 其制备方法”，直接应用人白细胞干扰素加辅料制成片剂，但该说明 书表明该制剂具有激素特性，给人的应用带来潜在的风险；再如，申 请号为200310110892.2的发明专利“复方干扰素诱生剂口含片”，以 及申请号为90101032.4的发明专利“人体内诱导干扰素的制造方 法”，利用新城疫减毒活疫苗作为干扰素诱生剂，外源病毒的引入也 会带来病毒重组、突变的潜在风险；申请号为200810154198.3的发 明专利“一种用于宠物的聚肌胞滴丸及其制备方法”，以及申请号为 ZL93105862.7的发明专利“聚肌胞复合物免疫佐剂及含有该佐剂的 疫苗”，利用聚肌胞作为抗病毒制剂或者免疫佐剂，但在制剂类型上， 不方便集约化养殖饮水给药，更不方便于水产养殖中通过药浴的方式 给药。

发明内容：

本发明的目的是提供一种内源性干扰素诱导物的注射液和纳米 微囊化溶液的制备方法，它应用内源性干扰素诱导技术，避免了干扰 素制剂本身种属特异性强的缺陷，并且可以通过多种方式给药，更方 便于生产实践中应用，具有起效剂量极低，降解产物可直接进入动物 机体代谢池继续代谢等特点，对于有效控制养殖动物病毒性感染，降 低药残危害具有重要意义。

为了解决背景技术所存在的问题，本发明是采用以下技术方案： 400ml-500ml注射用水中依次加入焦亚硫酸钠0.7g-0.9g、氯化钠 1.4-g1.6g以及适量的磷酸二氢钠与磷酸氢二钠，加热至20-60℃， 进一步优选为30-50℃之间的某一特定温度，加入2800mg--3000mg 聚胞苷酸搅拌使溶解，保温10分钟，然后加入2800mg-3000mg聚肌 苷酸搅拌使溶解，保温配对15-30分钟，即得到聚肌胞苷酸母液。

为进一步增强双链配对的紧密性，提高聚肌胞苷酸作为内源性干 扰素诱导剂的使用效果，并使之方便应用于小群体养殖的动物，按特 定方法将聚肌胞苷酸制备成为稳定的注射液制剂。基本过程为：取聚 肌胞苷酸母液200ml-300ml，加入CaCl₂ 0.46g，充分搅拌使溶解， 用注射用水定容至900ml-1000ml，0.45um微孔滤膜过滤，安瓿瓶灌 封，100℃流通蒸汽灭菌30分钟，流水中迅速冷却，灯检，贴标，即 得到聚肌胞苷酸注射液。该注射液可用于宠物、小群体养殖的动物病 毒性感染的防治。