[发明专利]对虾白斑综合征病毒VP37酵母表面展示与应用无效
| 申请号： | 200910215936.5 | 申请日： | 2009-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN102021124A | 公开（公告）日： | 2011-04-20 |
| 发明（设计）人： | 刘庆慧;黄捷;李新新;张秀丽 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;A61K39/12;A61P31/20;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/93;C12R1/865;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266071 *** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 对虾 白斑 综合征 病毒 vp37 酵母 表面 展示 应用 | ||
1.一种表面展示对虾白斑综合征病毒VP37重组酵母及其制备方法，是利用酵母表面展示载体，与对虾白斑综合征病毒蛋白VP37基因重组，构建融合表达的重组质粒，并转化酿酒酵母菌得到表面展示VP37的重组酵母菌。
2.如权利要求1所述的表面展示对虾白斑综合征病毒VP37重组酵母及其制备方法，其特征在于，所述的重组酵母为含有对虾白斑综合征病毒蛋白VP37基因的重组酵母菌EBY100，所述的重组酵母菌表面有VP37。
3.如权利要求1所述的表面展示对虾白斑综合征病毒VP37重组酵母菌活疫苗在养殖甲壳动物免疫中的应用。
4.如权利要求2所述的表面展示对虾白斑综合征病毒VP37重组体的制备方法，其特征在于，构建所述的对虾白斑综合征病毒VP37表达载体时，先用EcoRI和XhoI两种限制性内切酶将PCR扩增的VP37产物与pYD1空载体分别双酶切，然后将双酶切的产物连接并转化入感受态大肠杆菌TOP10，PCR筛选插入VP28基因的阳性克隆，测序验证正确的阳性克隆即为重组表达体(pYD1-VP37)。
5.如权利要求4所述的表面展示对虾白斑综合征病毒VP37重组体，其特征在于，它包括：编码VP37的核苷酸序列，或者所述核苷酸序列能在中等严谨条件下与SEQ IDNO.1中1-843位的核苷酸杂交。
6.如权利要求1所述的表面展示对虾白斑综合征病毒VP37重组酵母的制备方法，其特征在于，将所述的重组表达体转化入酵母菌EBY100感受态细胞，再将转化产物涂布在YNB选择培养基上于25-30℃下培养24-48h，挑取长出的单菌落，用菌落PCR的方法筛选阳性转化子，阳性转化子即为表面展示对虾白斑综合征病毒VP37重组酵母。
7.如权利要求1所述的表面展示对虾白斑综合征病毒VP37重组酵母，其特征在于，它包括，具有SEQ NO.2所示的氨基酸序列，或其活性片段，或其活性衍生物。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于发酵生产所述的展示对虾白斑综合征病毒VP37重组酵母菌活疫苗时，是将所述的重组酵母菌接种于含1.0-2.5％葡萄糖的YNB-CAA的培养基中，在25-30℃下振荡培养过夜，至OD600值在2-5，离心菌体，用生理盐水悬浮菌体并接入YNB-CAA(含D-半乳糖)液体培养基中，在20-30℃下诱导培养36-60h，将所得的培养物离心并用PBS洗涤，获得重组酵母菌活疫苗。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国水产科学研究院黄海水产研究所，未经中国水产科学研究院黄海水产研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/200910215936.5/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
