[发明专利]性传播疾病检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种性传播疾病的检测技术，特别是检测人生殖器分泌物病原体的检测方法，试剂盒以及相应的引物。

背景技术

性传播疾病(sexually transmitted disease STD)既是人类最古老的疾病之一，也是世界上发病最广泛的传染病。STD是一类主要通过已感染者与未感染者之间的性接触而传播的疾病，它的概念已从过去经典的5种病原体导致的疾病扩展为与性行为接触密切相关的20余种病原体引起的传染病。近年来，STD发病率呈现上升趋势，由1980年全国仅报告48例STD感染者到2000年全国报告感染者859040例，STD在我国迅速蔓延。STD可引起男、女泌尿生殖道感染，造成不孕不育甚至癌变。目前STD的流行已对人群健康构成了严重威胁。此外，大约有50％的STD患者无症状，若因诊断延误导致治疗不及时不仅会成为重要传染源进一步加速STD的传播，而且会导致一系列并发症和后遗症的发生，严重危害人群健康。多种STD病原体混合感染率是目前STD防治工作的新挑战，据估计目前STD病原体混合感染率高达28.8％。淋球菌(NG)，沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)是泌尿生殖系统STD中的最主要病原体，同时也是最易产生混合感染的3种病原体。快速有效地检测NG，CT和UU病原体的携带者是积极干预STD传播及治疗STD患者的前提。

目前淋球菌(NG)，沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)的病原学检测方法包括培养法和非培养法。培养法敏感、特异，是金标准，但其耗时过长、对标本的采集与运送要求高使其不能满足临床和疾病控制的需要。非培养法(如检测NG感染常用的涂片革兰氏染色和CT感染常用的ELISA法)简便但敏感性低，易受干扰。因此开发并普及新的检测方法意义重大。

近年来发展起来的荧光定量PCR(Fluorescence Quantitative PCR，FQ-PCR)技术已经在基因表达水平分析病原体的定性和定量检测等方面得到广泛运用，并以其特异度高，灵敏度高，精确，快速的优势成为STD病原体非培养法临床检测的重要方法之一。但是，目前的NG，CT和UU检测荧光定量PCR试剂盒均为一病一盒，一次只能检测一种病原体，不利于混合感染的检测，此外，FQ-PCR技术对检测设备要求和操作人员要求高，不利于在中国广大基层医疗机构中的普及和推广，同时，检测一种性病病原体就需要做一次PCR试验，这一方面增加了医务人员的工作量，同时加大了标本被污染的可能性，另一方面也极大的增加了成本。因此，利用PCR技术高效精确的优势，开发更加经济、简便而又拥有高特异度和灵敏度的淋球菌(NG)，沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)快速检测手段，有利于降低检测费用和检测周期，使之更好的用于临床的普及推广及流行病学调查。

近年来产生的多重PCR技术(Multiplex PCR US2002/037238)正在被用于临床检验领域，如：Multiple PCR primer group for human HNF-1alpha gene amplification，KR 80909/2001；RHD and ABO genotyping by multiplex PCR，WO2006/032897；检测乳腺癌易感基因突变的多重PCR试剂盒及其制备方法，CN101200766等。其中，该技术在检测STD感染方面的应用包括：Rapid one step detection of pathofenic bacteria in urine with sexually transmitted disease(STD)and prostatitis patient by multiplex PCR assay(mPCR)，Sang Rok Lee，The Journal of Microbiology，October2007，p.453-459；Multiplex PCR-RLB检测常见性病病原体的实验研究，中国学位论文文摘数据库；单管多重PCR技术快速检测四种性传播疾病的病原菌，唐文志，现代检验医学杂志-2008.23(6).-16-19等。

国内外未见一种检测淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)的银染试剂盒。同时，未见采用多重PCR技术同时检测淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)三种病原体DNA并使用银染法进行分离检测的方法。

鉴于目前性传播疾病的高发态势，迫切需要开发一种检测效率高，成本低廉，便于基层卫生部门使用的检测方法和试剂盒。

发明内容