[发明专利]一种快速检测产肠毒素大肠杆菌的试剂盒及方法

权利要求书

1.一种检测产肠毒素大肠杆菌的试剂盒，其特征是：含有下列引物

SEQ ID NO：1 attacatttaagagcggcgc；

SEQ ID NO：2 ggttcctagcattagacatgcttt；

SEQ ID NO：3 gtgtatggaataataaaacccctaaagcaaactagttttcca；

SEQ ID NO：4 gtgtccttcatcctttcaatggcaggtcgaagtcccgggcagtc

可以特异性扩增来自产肠毒素大肠杆菌的基因。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征是：所述产肠毒素大肠杆菌的基因为编码不耐热肠毒素的基因。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征是：所述的不耐热肠毒素基因序列如SEQ ID NO：5所示。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征是：所述试剂盒还含有Mg2+。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征是：含有显色剂。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征是：所述显色剂是绿色核酸凝胶染液(SYBR Green I)鉬酸铵或硫酸铜。

7.一种快速检测食品是否被产肠毒素大肠杆菌污染的方法，包括以下步骤：

1)提取待检样本中的DNA；

2)用引物对样本中的DNA进行扩增，所述引物如SEQ ID NO：1～4所示；

3)对DNA扩增结果进行检测。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征是：步骤2)的扩增条件为，dNTPs浓度为0.6mM，Bst酶添加量为8U，扩增温度为55-65℃，扩增反应最短反应时间为40min。

9.根据权利要求7所述的检测方法，其特征是：步骤3)所述的检测DNA扩增结果的方法是：观察是否生成焦磷酸镁沉淀或沉淀显色。

10.如SEQ ID NO：1～4所示寡核苷酸序列的用途，其特征是：其用于扩增或检测来自病原体产肠毒素大肠杆菌的基因。