[发明专利]分离核酸的方法、试剂及套组有效
申请号: | 200910217168.7 | 申请日: | 2009-12-31 |
公开(公告)号: | CN102115739A | 公开(公告)日: | 2011-07-06 |
发明(设计)人: | 江佩馨;巫昆展;苏钰婷;林嘉芸;苏秀卿;林玉娟 | 申请(专利权)人: | 财团法人工业技术研究院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C07H21/00;C07H1/06 |
代理公司: | 北京三友知识产权代理有限公司 11127 | 代理人: | 韩蕾 |
地址: | 中国台*** | 国省代码: | 中国台湾;71 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分离 核酸 方法 试剂 | ||
1.一种分离核酸的方法,该方法包括:
将一分离试剂与一含有核酸的生物样本混合后,所述分离试剂会使核酸自生物样本中分离出来并结合至一固相载体上,其特征在于:
所述分离试剂包括1~40wt%的聚乙二醇和/或大于30wt%的低分子量醇类、一盐类及一表面活性剂,其通过改变核酸的溶解度使核酸结合至所述固相载体。
2.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述低分子量醇类的分子量为30~100g/mol。
3.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述低分子量醇类为乙醇。
4.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述低分子量醇类的重量浓度为40~60%。
5.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述聚乙二醇的重量浓度为5~20%。
6.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述固相载体包括金属、金属氧化物、硅化物或聚合物。
7.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述固相载体包括磁性物质。
8.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述盐类包括碱金族、碱土族和/或铵盐卤化物。
9.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述表面活性剂包括Tween-20、Triton X-100、NP40、Brij35或CHAPS。
10.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述试剂还包括一蛋白质水解酶。
11.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述试剂还包括一糖类。
12.如权利要求11所述的分离核酸的方法,其中所述试剂包括一多糖类或多糖类衍生物。
13.如权利要求12所述的分离核酸的方法,其中所述多糖类包括肝糖、淀粉、低聚糖、葡聚糖、纤维素、琼脂糖、几丁聚糖、黏多糖、肽聚糖。
14.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述试剂与生物样本的混合反应温度为50℃~80℃。
15.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述生物样本与试剂的混合酸碱值为pH 6~9。
16.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述生物样本包含有一或多个核酸。
17.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述生物样本包含有细胞物质。
18.如权利要求1所述的分离核酸的方法,其中所述生物样本包括原核生物、真菌、病毒、细胞、血液、羊水、脑脊液,或来自皮肤、肌肉、结膜、胎盘或肠胃道的组织及其组织液。
19.如权利要求1所述的分离核酸的方法,该方法还包括在所述生物样本与试剂混合后,进行一清洗程序。
20.如权利要求19所述的分离核酸的方法,该方法还包括在所述清洗程序后,进行一冲提程序。
21.一种分离核酸的试剂,该试剂包括1~40wt%的聚乙二醇和/或大于30wt%的低分子量醇类、一盐类、一表面活性剂、以及一固相载体。
22.如权利要求21所述的分离核酸的试剂,其中所述低分子量醇类的分子量为30~100g/mol。
23.如权利要求21所述的分离核酸的试剂,其中所述低分子量醇类为乙醇。
24.如权利要求21所述的分离核酸的试剂,其中所述低分子量醇类的重量浓度为40~60wt%。
25.如权利要求21所述的分离核酸的试剂,其中所述聚乙二醇的重量浓度为5~20wt%。
26.如权利要求21所述的分离核酸的试剂,其中所述盐类包括碱金族、碱土族和/或铵盐卤化物。
27.如权利要求21所述的分离核酸的试剂,其中所述表面活性剂包括Tween-20、Triton X-100、NP40、Brij35或CHAPS。
28.如权利要求21所述的分离核酸的试剂,其中所述固相载体包括金属、金属氧化物、硅化物或聚合物。
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