[发明专利]一种喷鼻免疫流感五价或多价灭活疫苗的制备及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物制药领域，涉及一种疫苗及其制备方法，特别涉及一种喷鼻免疫流感五价或多价灭活疫苗及其制备方法。

背景技术

流行性感冒是由流感病毒引起的一种损害呼吸系统为主的疾病，在世界范围内广泛流行，是严重危害人类健康的重要传染病之一。流感病毒感染通过病毒体表面HA蛋白附着于含唾液酸细胞受体(糖蛋白和糖脂)而被引发。NA蛋白介导唾液酸受体的加工，且病毒对细胞的侵入依赖于HA依赖性受体介导的胞吞作用。在内化的含流感病毒体的内体的酸性境界中，HA蛋白经历构象变化，导致病毒和宿主细胞膜融合，随后病毒脱壳，M1蛋白在M2的介导下从核壳相关核糖核蛋白(RNP)释放，进入细胞核以进行病毒RNA合成。针对HA分子的抗体可以通过中和病毒感染性来预防病毒感染，而针对NA蛋白的抗体介导它们对病毒复制早期步骤的作用。

疫苗是预防和控制流感最有效的手段。迄今为止，流感疫苗经历了60多年的发展历程，在人类与传染病的斗争中发挥了重要作用。目前得到许可的灭活甲型和乙型流感病毒疫苗是作为供非消化道施用的三价疫苗。这些三价疫苗是在含胚鸡卵尿囊腔中作为单价的总物料产生，通过速率区带离心或柱层析纯化，用福尔马林或β-丙内酯灭活，然后配制成特定年份人群中流行的两株甲型和乙型流感病毒株的混合物。现有的商品化流感疫苗是全病毒(WV)或亚病毒体(SV，裂解或纯化的表面抗原(split or purified surfaceantigen))病毒疫苗。WV疫苗含有完整的灭活病毒体。用诸如磷酸三正丁酯等溶剂处理过的SV疫苗(Flu-Shield，Wyeth-Lederle)含有几乎所有的病毒结构蛋白和一些病毒包膜。用TritonX-100溶解的SV疫苗(Fluzone，Sanofi-Aventis；Fluvirin，Novartis)主要含有HA单体、NA、M1和NP的聚集物，尽管存在残余量的其它病毒结构蛋白。2003年6月，FDA对一种活的减毒冷适应病毒疫苗(FluMist，MedImmune)授予了销售许可，批准其作为鼻内投药疫苗用于2-49岁的健康人群中针对甲型及乙型流感病毒所引起的疾病的自动免疫接种和预防的商业应用。此外，已经开发了数种重组产品作为候选的重组流感疫苗。这些手段均着眼于甲型流感病毒HA和NA蛋白的表达、生产和纯化，包括使用杆状病毒感染的昆虫细胞(Crawford et al，1999；Johansson，1999；Treanor et al.，1996)，病毒载体(Pushko et al.，1997；Berglund et al.，1999)，和DNA疫苗构建体(Olsen et al.，1997)表达这些蛋白。因此，随着现代免疫学方法的日新月异，一种具有更强交叉免疫保护的喷鼻流感五价或多价灭活疫苗应运而生。

回顾历史，上个世纪的3次流感大流行，给世界带来的灾难性后果至今令人触目惊心。据WHO报道，每年全球死于流感的有25万-50万人。在正常的流行季节，约10％的人口即5亿多人患流感，目前还未找到十分理想的防治药物，接种流感疫苗仍是当今预防流感的有效措施。近年来，高致病性H5N1亚型人禽流感病毒跨种感染人的事件，并显示了人传人的证据，给人类健康和生命安全带来严重威胁。特别是，2009年4月以来美国、墨西哥等多国出现的甲型H1N1流感疫情在全球肆虐，使人类陷入流感暴发的恐慌之中。6月11号WHO将甲型H1N1流感的警戒级别提升到最高级--6级。与此同时，WHO要求各国要严加对季节性流感病毒(H1N1、H3N2和B型)、高致病性H5N1亚型人禽流感以及甲型H1N1流感进行监控，并应对潜在发生的流感大流行做好充分准备。为此，有效预防这些流感亚型的随机重配和混合感染成为当今世界科学家们面临的重大科学难题。因此，喷鼻免疫的人用流感五价(H1N1、H3N2、H5N1、B型和甲型H1N1)及多价灭活疫苗的研制迫切又极为重要。

发明内容

本发明目的在于提供一种喷鼻免疫流感五价或多价灭活疫苗，本发明的目的还在于公开该疫苗的制备方法和应用。

本发明目的是通过如下技术方案实现的。

本发明疫苗包括流感五价或多价灭活疫苗抗原和黏膜免疫佐剂。