[发明专利]奶山羊GHRHR基因的单核苷酸多态性及其检测方法无效
申请号: | 200910219003.3 | 申请日: | 2009-11-17 |
公开(公告)号: | CN101705289A | 公开(公告)日: | 2010-05-12 |
发明(设计)人: | 陈宏;刘艳丽;蓝贤勇;屈玉娇;李转见;陈忠琦;雷初朝;胡沈荣 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 陆万寿 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 山羊 ghrhr 基因 核苷酸 多态性 及其 检测 方法 | ||
1.一种奶山羊GHRHR基因的单核苷酸多态性的检测方法,其特征 在于,包括以下步骤:
以包含GHRHR基因的待测奶山羊全基因组DNA为模板,以引物对P 为引物,PCR扩增奶山羊GHRHR基因;用限制性内切酶MspI消化PCR 扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳;根据电泳结 果鉴定SEQ ID NO.1所示的奶山羊GHRH基因序列表的第231位碱基多态 性;
根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定奶山羊GHRHR基因第7307位的单核苷 酸多态性为:CC基因型表现为291bp和134bp条带;CG基因型表现为 21bp、195bp、134bp和96bp条带;GG基因型表现为195bp、134bp和 96bp条带;
所述的引物对P为:
上游引物P1:acgccaccct ctttcaccc 19;
下游引物P2:catcctgggt gcttcttgaa g 21。
2.如权利要求1所述的奶山羊GHRHR基因的单核苷酸多态性的检测 方法,其特征在于,所述的PCR扩增反应程序为:95℃预变性4~5min; 94℃变性30s,57.0℃复性35s,72℃延伸35s,30~35个循环;72℃ 延伸10min。
3.如权利要求1所述的奶山羊GHRHR基因的单核苷酸多态性的检测 方法,其特征在于,所述的琼脂糖凝胶电泳为质量浓度为2%的琼脂糖凝胶 电泳。
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