[发明专利]一种用金磁微粒纯化总核酸的方法

权利要求书

1.一种用金磁微粒纯化总RNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）制备含有总核酸的样品裂解液

1.1）取50 mg 鼠肝脏组织样本放入玻璃匀浆器，加入1 ml 锂盐 裂解液匀浆；该锂盐裂解液含3 M的LiCl；

1.2）将样品裂解液移入离心管中，置于冰上备用；

2）结合

2.1）取100μl 金磁微粒于另一离心管中，将其置于磁性分离器上磁 性分离直至上清澄清，弃去上清液；

2.2）取下离心管，向离心管中加入600μl 结合缓冲液，混匀备用； 该结合缓冲液含1 M的NaCl和10 %（W/V）的聚乙二醇，其中聚乙二 醇的分子量是8000；

2.3）用移液器移取步骤1.2）的样品裂解液300μl加入步骤2.2）的离 心管中，吹吸混匀，室温静置5 min，然后将该离心管置于磁性分离 器上，磁性分离至上清澄清，弃去上清液；

3）清洗

取下离心管，向离心管中加入600μl 浓度为75 %（V/V）的乙醇溶 液，吹吸混匀，将其置于磁性分离器上，弃去上清液，室温晾干5 m in；

4）消化

向离心管中加入85μl 无核酸酶水、10μl RDD buffer和5μl D Nase，吹吸混匀，室温静置15 min；

5）再结合

向离心管中加入600μl结合缓冲液吹吸混匀，室温静置2 min；将离 心管置于磁性分离器上，磁性分离至上清澄清，弃去上清液；该结合 缓冲液含1 M的NaCl和10 %（W/V）的聚乙二醇，其中聚乙二醇的分 子量是8000；

6）清洗

重复步骤3）两次，室温晾干5 min；

7）洗脱

向离心管中加入200 μl无核酸酶水，吹吸混匀，室温静置5 min； 然后将离心管置于磁性分离器上分离至上清澄清；所得上清液即为从 鼠肝脏组织样本中纯化得到的总RNA溶液。