[发明专利]一种提高蝴蝶兰繁殖系数的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及名优花卉蝴蝶兰优良品种繁殖系数的提高。

技术背景

蝴蝶兰Phalaenopsis hybrid属热带气生兰，生长在热带及亚热带地区的兰科Orchidaceae植物，其花姿高雅，株型美观，色彩艳丽，花期持久，在热带中有“兰花皇后”之美称，是兰科植物中栽培最广泛、最普及的种类之一，是国际上最具有商业价值的四大观赏热带兰之一，在国内外有广泛的市场。但是，蝴蝶兰的再生能力弱，多采用分株繁殖，繁殖率低且多带病。种子繁殖发芽率又极低，难以满足市场的需求。所以，在国外很早采用组织培养来快速繁殖种苗。但由于蝴蝶兰为单茎性气生兰，利用茎尖为外植体对母株的伤害较大，浪费较多，所以近几年来随着植物组织培养技术对蝴蝶兰的应用，也较多的利用胚、幼叶、茎尖、根段、花梗及花梗腋芽等多器官作为外植体进行组织培养研究。在近几年的报道也有对原球茎发生和增殖的影响因素的研究。然而，现有关于蝴蝶兰组织培养的专利和文献仅提到培养基配方，通常使用较高浓度的植物激素，这样很容易产生畸形苗；且培养基中均使用活性炭，由于活性炭对于植物激素具有一定的吸附作用，因此繁殖系数往往并不理想，难以满足生产的需要。

发明内容

本发明旨在提供一种提高蝴蝶兰繁殖系数的方法。

本发明的具体步骤如下：

1.取由花梗诱导出的原球茎为外植体；

2.将生出的原球茎分离成以一个芽为单位的小块，接种于培养基质中，接种密度为20～25个以一个芽为单位的小块/75cm²培养基质，优选接种密度25个以一个芽为单位的小块/75cm²培养基质；

所述的培养基质是以经高温高压(121℃，1.0～1.2个大气压，15min)灭菌泥炭藓(Sphagnum palustre)；

3、接种后按下述条件培养：培养温度为25℃±2℃，培养基pH值为5.6～5.8，光照时间为12～16小时，光照强度为2000～2500lux；

每周向其中注射经抽滤灭菌的MS培养液，用量为20mL/次/75cm²；注射周期为1次/周；需做高温高压灭菌(121℃，1.0～1.2个大气压，20min)后用无菌注射器在超净工作台上加入。注射方法相当于自然状态下盆栽蝴蝶兰的施肥。

所述的MS培养液中与常规MS(Murashige和Skoog，1962)培养液的不同之处在于：MS培养液蔗糖含量降为20g/L；在此基础上再添加6BA(6-苄基腺嘌呤)至1.0～2.0mg/L，优选2.0mg/L；以及添加NAA(萘乙酸)至0.1～0.2mg/L；优选0.1mg/L；

MS培养液中所使用的蔗糖可用市售白砂糖替换；

本发明中所用植物激素6BA和NAA均使用无菌滤膜(孔径规格为0.22mm)进行抽滤灭菌。

4.培养60天后将组培苗放在自然光下开瓶炼苗3～4天后，向温室移栽。

步骤1～3均在无菌环境下进行。

有益效果

本发明具有如下特点：

1.培养成本降低(不使用活性炭，所需培养瓶数量少，不使用琼脂)，减少了频繁更换培养基所耗费的人力和财力。

2.培养物畸形苗数量减少，繁殖系数增加，苗木移栽成活率提高，能够满足生产上对苗木的要求。

3.采用自然界中易寻的天然物泥炭藓为培养基，培养基中不加活性炭和琼脂，为气生根呼吸创造了良好的条件，并减少了褐变的发生。

4.利用了蝴蝶兰具有群居型的生物学特性，适当加大接种密度，获得了较高的增殖率。

5.该技术重复性强，操作简单。

6.该技术不受季节限制，在实验室中可以周年使用。

说明书附图

本发明共有附图1幅，图1为实施例1中的原球茎在灭菌泥炭藓基质中培养60天的生长状态。

具体实施方式

试验例：一种提高蝴蝶兰繁殖系数的方法，品种为“红龙”(Dtps.Ben Yu Star″Red Dragon″)。

1.取由花梗诱导出的原球茎为外植体；

2.将生出的原球茎分离成以一个芽为单位的小块，接种于新的培养瓶中，每瓶(150mL规格的三角瓶)接种。