[发明专利]一种生物分子竞争分析方法及其应用

权利要求书

1.一种生物分子竞争分析方法，其特征在于它为利用核酸适体作为亲和配体，与标记的靶标一起建立的竞争分析方法，包括以下步骤：

(1)靶标核酸适体包被；

(2)与标记的靶标分子孵育结合；

(3)加入靶标样品竞争分析；

(4)洗涤后，加入底物进行分析。

2.根据权利要求1所说的一种生物分子竞争分析方法，其特征在于所说的步骤(1)中的核酸适体包被是由核酸适体通过直接或间接的方式以共价键或非共价键形式包被在固相基质上。

3.根据权利要求1所说的一种生物分子竞争分析方法，其特征在于所说的步骤(1)中的核酸适体既能与标记的靶标结合，也能与靶标结合，但其与靶标结合的能力高于与标记靶标结合的能力，靶标可竞争标记靶标结合核酸适体。

4.根据权利要求1所说的一种生物分子竞争分析方法，其特征在于所说的核酸适体为单链DNA即ssDNA或RNA。

5.根据权利要求1所说的一种生物分子竞争分析方法，其特征在于所说的核酸适体是通过指数富集配体进化系统即SELEX技术体外筛选获得的与靶标有特异结合的核酸序列。

6.根据权利要求5所说的一种生物分子竞争分析方法，其特征在于所说的核酸适体的筛选包括以下步骤：

①合成制备ssDNA或RNA文库；

②以标记的靶标作为筛选分子，富集与其特异亲和的核酸序列；

③用靶标竞争洗脱，获得靶标特异的多克隆核酸适体，制备次级文库；

④筛选数轮，克隆测序，获得靶标的单克隆核酸适体。

7.根据权利要求1、3、5或6所说的一种生物分子竞争分析方法，其特征在于所说的靶标是生物检测中靶标，包括生物大分子或生物小分子。

8.根据权利要求1或6所说的一种生物分子竞争分析方法，其特征在于所说的靶标分子的标记方法采用放射性同位素标记法、荧光素标记法、生物素标记法、纳米材料标记法、用于ELISA检测或电化学分析的酶类标记法或电化学活性物质标记法；其中用于ELISA检测或电化学分析的酶类标记法中的酶类包括辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β半乳糖苷酶、过氧化物酶、葡萄糖氧化酶或葡萄糖6磷酸脱氢酶。

9.根据权利要求1所说的一种生物分子竞争分析方法，其特征在于所说的步骤(4)中进行分析的方法为比色法、放射性同位素分析法、荧光分析法、化学发光分析法或电化学检测法。

10.根据权利要求1所说的一种生物分子竞争分析方法，其特征在于它可以用于致病物质在体内体外的检测分析、体液生物分子实验研究、食品安全监测、生物防恐监测、环境监测领域。