[发明专利]一种干酪乳杆菌微胶囊的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其是一种干酪乳杆菌微胶囊的制备方法。

背景技术

益生菌是活的微生物，通过摄入充足的数量，对宿主产生一种或多种特 殊且经论证的功能性健康益处。如：改善肠道功能、营养功能、抗癌功能、 免疫功能、抗过敏功能与抗高血压等。干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)属 于乳杆菌类益生菌，是人体肠道的重要微生物，与人体的健康有密切的联系。 干酪乳杆菌具有高效降胆固醇，并且能够诱导产生抗菌素、促进细胞分裂、 产生抗体免疫及抗癌等作用；干酪乳杆菌还具有缓解乳糖不耐症、增强人体 免疫、缓解过敏、预防癌症和抑制肿瘤生长等益生保健作用。因此，将干酪 乳杆菌应用于乳制品等产品中可提高产品的保健功能。

益生菌制品从生产、运输、销售，到被口服经上消化道到达肠道的过程 中，益生菌需经受一系列不良环境(如有氧状态、低pH值等)的影响，如 经不住胃酸和胆汁的杀伤作用，导致到达肠道的活菌数大量减少，也不能在 肠内定殖，其益生作用会受到极大的限制。因此，益生菌应用时面临的关键 问题在于菌株产品制造、储存销售期间的稳定性。从理论上诠释各种加工条 件对其生长和存活的影响，在技术上寻求新的突破口是十分重要的。

利用微胶囊包埋技术保护益生菌是目前国内外研究的热点，将益生菌活 菌完全隔绝空气和降低其对温度的敏感性出发，运用制备微囊的方法，采用 成膜材料，将包埋与低温干燥有机结合起来，在低温干燥的同时迅速在益生 菌活菌体周围形成一层类似微囊的保护膜，从而达到减少甚至避免菌体冻干 损伤、保护益生菌免受噬菌体的侵害、提高活菌存活率、延长活菌常温保存 期、提高活菌常温贮存过程中稳定性的目的。但目前国内外对干酪乳杆菌进 行包被的甚少，使其益生功能不能充分被利用；且现有的益生菌微胶囊制品 颗粒较大，壁材不具有良好的肠溶性，在胃液中易破裂或不能在肠道内迅速 崩解，致使益生菌不能顺利在肠道内定殖。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足之处，提供一种干酪乳杆菌微胶囊 的制备方法，此方法可延长干酪乳杆菌的存活期，可更好的发挥其益生作用。

本发明的目的是这样实现的：

一种干酪乳杆菌微胶囊的制备方法，步骤如下：

(1)离心制得干酪乳杆菌菌体，然后用生理盐水制成菌悬液，菌悬液中菌 体浓度为10⁸～10⁹cfu/mL；

(2)菌悬液与第一层包埋材料2％～6％微孔淀粉溶液1∶1混合(V/V)， 100～600r/min，10～60min搅拌均匀至吸附；

(3)再加入为上述混合溶液2倍体积的2～6％的海藻酸钠溶液， 100～600r/min，10～60min室温搅拌均匀；

(4)将上述混合液滴到1～6％的CaCl₂溶液中，在10～30℃固化20～60min， 无菌水洗涤，过滤；

(5)湿球温度在2～6℃下干燥36～72h，即制得干酪乳杆菌微胶囊。

而且，所述步骤(1)中的干酪乳杆菌菌体在离心力为4000～10000g、离心 10～60min后，离心所得的干酪乳杆菌菌体用生理盐水稀释，得到浓度为0.5％ 的菌悬液的菌体浓度为10⁸～10⁹cfu/mL。

而且，固化条件为固化液CaCl₂溶液的浓度为1～6％。

本发明的优点和积极效果是：

1、本发明所制备的干酪乳杆菌微胶囊在2～6℃下干燥36～72h后，所得 的微胶囊具有较强的耐酸性、耐胆盐能力与稳定的贮存性。在人工胃液中基 本不溶解，不发生渗漏，而在人工肠液中，立即崩解。并且在0.3％胆盐溶液 中处理1h后，菌体存活率为88％。4℃下贮存1个月活菌数从5.80×10⁹cfu/g 到1.24×10⁹cfu/g。干酪乳杆菌微胶囊可作为乳饮料的营养添加剂和益生菌补 充剂，对加入干酪乳杆菌微胶囊的乳饮料进行贮存稳定性测试，各项指标均 达国家标准。因此，微胶囊化干酪乳杆菌大大提高了干酪乳杆菌在产品中的 存活率，与益生菌的利用率，同时也丰富了益生菌微胶囊的品种。

2、本发明对干酪乳杆菌进行双层包埋，延长了菌体的存活期，使活性菌 能顺利的通过人体的胃和小肠，克服胃酸和胆汁的作用，在大肠内释放并定 殖，从而起到益生作用。