[发明专利]八角科植物“孩儿莲”的组织培养繁殖方法

权利要求书

1.一种八角科植物“孩儿莲”的组织培养繁殖方法，其特征在于，进行 离体组织培养，包括如下步骤：

1)以“孩儿莲”当年生枝条顶端的萌动芽为起始材料，经洗涤液浸泡、 流水冲洗工序洗净后，在室内晾干，用作组织培养繁殖的外植体；

2)将上述外植体在浓度为体积比70～75％的乙醇溶液中进行5～6秒钟 的表面处理后，在浓度为重量体积比0.1％的HgCl₂溶液中进行5～6分钟的 杀菌处理，再用无菌水充分清洗5～6次，完成对外植体的消毒灭菌处理；

3)从上述消毒灭菌后的枝条上切取芽片，接种到初代培养基上，在每天 光照12～15小时，光照强度为1500～2000LX、温度为23℃±1℃的条件下培 养，待新叶萌发后转移到继代培养基上继续培养，得到发育正常的组培苗；

所述的初代培养基为White培养基+500mg.L^-1抗褐化剂PVP+6-BA 2.0 mg.L^-1+NAA 0.5mg.L^-1，添加蔗糖和琼脂粉，按重量体积比，蔗糖浓度为初 代培养基的3％，琼脂粉浓度为初代培养基的0.6％；调节pH为5.6～5.8；

所述的继代培养基为White培养基+500mg.L^-1抗褐化剂PVP+6-BA 2.0 mg.L^-1+NAA 0.1mg.L^-1，添加蔗糖和琼脂粉，按重量体积比，蔗糖浓度为初 代培养基的3％，琼脂粉浓度为初代培养基的0.6％；调节pH为5.6～5.8。